摘要:目的分析成都某部感染乙型流感病毒遺傳進化與血凝素(HA)基因突變位點。方法通過犬腎上皮細胞(MDCK細胞)體外分離患者咽拭子標本流感病毒毒株,用PCR獲取乙型流感病毒HA基因并測序,與NCBI數據庫在線比對并利用MEGA 6.06軟件構建系統發育進化樹,分析突變位點。結果通過MDCK細胞接種,分離出1株乙型流感病毒株,以感染病例咽拭子核酸及分離毒株的核酸為模板進行PCR擴增得到1 755 bp全長HA基因,獲得的序列提交至GenBank數據庫,獲得基因登錄號為MH236281。通過在線比對及系統發育樹構建,該病例感染的病毒為Yamagata系乙型流感病毒。與乙型流感病毒Yamagata系的代表毒株Influenza B/Yamagata/16/88(GenBank No. M36105)相比,HA基因點突變堿基為57個;與世界衛生組織(WHO)推薦的疫苗株Influenza B/Utah/08/2014 (Gen Bank No. KU592766)相比,突變堿基數為20個。進一步對HA1氨基酸突變位點進行分析,與四川地區往年流行株相比均發生了不同程度的突變,其中與2010年四川溫江的分離株(GenBank No. KP461138)相比突變位點較少,僅有4處點突變;與WHO推薦的疫苗株Influenza B/Utah/08/2014相比,有2個氨基酸位點發生了變異,分別為L176Q和M255V,但突變沒有處于HA1上的抗原決定簇區域。其中176位點是一個全新的突變,以往四川流行毒株、Yamagata系的代表毒株Influenza B/Yamagata/16/88及WHO推薦的疫苗株Influenza B/Utah/08/2014的HA1 176位點均為亮氨酸(L),而本研究病例感染的乙型流感毒株HA1 176位點突變為谷氨酰胺(Q)。結論成都地區駐地部隊2017-2018流行季感染的乙型流感病毒HA基因已發生一些突變,但突變尚未造成抗原性的改變。
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