摘要：目的:探討兔角膜基質(zhì)細(xì)胞(CSCs)體外移植兔角膜后的存活時間。方法:體外培養(yǎng)原代兔CSCs,并行細(xì)胞免疫組化鑒定,利用慢病毒載體(LV)攜帶標(biāo)記基因增強型綠色熒光蛋白(EGFP)轉(zhuǎn)染兔CSCs,倒置熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染后細(xì)胞生長狀態(tài)及熒光強度,體外動物實驗,隨機分為2組,實驗組行LV-EGFP標(biāo)記的兔CSCs細(xì)胞懸液角膜基質(zhì)注射,對照組等量生理鹽水角膜基質(zhì)注射,轉(zhuǎn)染后1wk,1mo取材冰凍切片觀察移植的CSCs熒光,石蠟切片行蘇木素-伊紅(HE)染色觀察組織形態(tài)。結(jié)果:LV-EGFP轉(zhuǎn)染兔CSCs在倒置熒光顯微鏡下24h后可見少量熒光,96h和110h熒光較強,轉(zhuǎn)染后的CSCs與正常CSCs細(xì)胞形態(tài)無明顯差異;轉(zhuǎn)染后1wk,1mo實驗組中角膜基質(zhì)層中可見綠色熒光,對照組中無綠色熒光;石蠟切片1wk實驗組見明顯上皮細(xì)胞增生及角膜輕微水腫,少量炎癥細(xì)胞浸潤,轉(zhuǎn)染后1mo實驗組上皮細(xì)胞增生減弱,未見角膜層水腫;對照組1wk,1mo均未見明顯異常。結(jié)論:LV-EGFP標(biāo)記的兔CSCs行體外角膜基質(zhì)移植,可在角膜中至少存活1mo,且與鄰近組織相容性較好。