摘要：目的研究多重耐藥鮑曼不動桿菌噬菌體Abp1毒力蛋白穿孔素holin(holinAbp1)的生物學特性及其對細菌的毒性作用,并通過無細胞蛋白表達系統對毒力蛋白穿孔素融合蛋白進行表達。方法利用生物信息學技術分析holinAbp1的蛋白結構特點,利用PCR技術從噬菌體Abp1基因組擴增holinAbp1基因,構建表達載體pET23bholinAbp1-gfp并轉化至大腸桿菌BL21(DE3)中以及無細胞蛋白體系中表達,利用Western印跡鑒定蛋白表達情況。結果噬菌體Abp1的holin蛋白屬于穩定疏水性蛋白,含有3個跨膜區域,屬于Phage-holin-3-1家族,成功克隆了holinAbp1-gfp基因,holinAbp1-gfp蛋白在大腸桿菌內無法正確表達,對大腸桿菌表達宿主具有明顯抑制作用,而在無細胞蛋白表達系統實現了蛋白表達。結論通過無細胞蛋白表達系統實現了holinAbp1-gfp融合蛋白表達,將為毒力蛋白的表達和噬菌體治療藥物的研發提供應用基礎和技術支持。