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人CDK14基因表達熒光定量PCR檢測方法的建立及初步應用

摘要:目的 建立一種人細胞周期蛋白依賴性激酶14(CDK14)基因表達熒光定量PCR檢測方法。方法 利用Trizol法提取不同人肺癌細胞株中總RNA,以β-Actin和CDK14分別為內參和目的基因,分別設計特異性擴增引物,建立人CDK14基因表達熒光定量PCR檢測系統并評估其檢測性能。同時將其應用于不同細胞系siRNA干擾前后的CDK14基因相對表達水平檢測。結果 經電泳分析、熔解曲線、產物測序確認人CDK14基因表達熒光定量PCR檢測系統已建立,其特異性良好,重復性佳(CV=7.13%),線性范圍較寬(CDK14與β-Actin分別在Ct值范圍22.47~32.96與15.14~27.55間具有良好的相關性,r^2=0.9844。)。利用該體系檢測發現:在HCC827 D5和H1650細胞中CDK14基因高表達; 在1~3號干擾片段中,1號片段為有效片段。結論 人CDK14基因表達熒光定量PCR檢測方法已成功建立。

關鍵詞:
  • 細胞周期蛋白依賴性激酶14  
  • 基因  
  • 實時熒光定量pcr  
作者:
羅凱; 黎謝夢丹; 石興源; 賈曉婷; 王倩; 鄧敏; 仇秦威; 張志杰; 賀智敏
單位:
廣州醫科大學附屬腫瘤醫院/廣州醫科大學腫瘤研究所; 廣州510095
刊名:
陜西醫學檢驗

注:因版權方要求,不能公開全文,如需全文,請咨詢雜志社

期刊名稱:陜西醫學檢驗

陜西醫學檢驗雜志緊跟學術前沿,緊貼讀者,堅持指導性與實用性相結合的原則,創辦于1986年,雜志在全國同類期刊中有很重的學術價值。

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