摘要:目的:本研究利用CRISPR/Cas9構(gòu)建穩(wěn)定遺傳的斑馬魚TYRO3純合突變體,為利用斑馬魚研究TYRO3功能構(gòu)建模型。方法:通過PCR和測序鑒定基因型,篩選獲得TYRO3基因突變斑馬魚。通過觀察斑馬魚水腫的表型以及用透射電鏡觀察足突融合的情況了解TYRO3突變的影響。結(jié)果:我們得到了兩個移碼的TYRO3突變體,每個TYRO3突變體在F2中獲得2和5個純合子,并且F0雜合子突變率可達50%。TYRO3基因突變斑馬魚出現(xiàn)卵黃囊、心包及眼周水腫,電鏡下出現(xiàn)明顯的足突融合。結(jié)論:本研究成功構(gòu)建了TYRO3基因突變的純合子斑馬魚,并初步證實,TYRO3突變會導(dǎo)致斑馬魚腎臟足細(xì)胞損傷。
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