摘要:目的探討腫瘤壞死因子相關(guān)受體因子6(Traf6)對乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖的影響及其可能的作用機制。方法采用pGPU6/Neo載體構(gòu)建穩(wěn)定敲除Traf6的MCF-7細(xì)胞株,應(yīng)用實時定量PCR和免疫印跡驗證Traf6基因和蛋白的均低表達,采用細(xì)胞計數(shù)試劑盒-8(CCK8)法檢測MCF-7細(xì)胞增殖情況,流式細(xì)胞儀檢測MCF-7細(xì)胞周期的變化,蛋白印記法(Western Blot)檢測MCF-7細(xì)胞中周期蛋白A(Cyclin A)、周期蛋白B(Cyclin B)、周期蛋白依賴激酶(CDK/p34)表達量和轉(zhuǎn)錄生長因子β-活化激酶1(TAK1)磷酸化水平。結(jié)果使用pGPU6/Neo載體能夠穩(wěn)定的敲除MCF-7細(xì)胞中Traf6的表達,敲除Traf6能夠抑制MCF-7細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡,將細(xì)胞阻滯在G1期,同時抑制細(xì)胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B及CDK/p34的表達及TAK1磷酸化。結(jié)論Traf6表達的降低能抑制TAK1信號通路活性,進而抑制乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖能力。
注:因版權(quán)方要求,不能公開全文,如需全文,請咨詢雜志社