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瓜實(shí)蠅熱激蛋白Hsp90基因克隆及表達(dá)分析

摘要:【目的】熱激蛋白基因Hsps在生物體抗逆性過(guò)程中具有重要的作用,本文旨在通過(guò)闡釋瓜實(shí)蠅Bactrocera cucurbitae (Coquillett)熱激蛋白基因Hsp90在其對(duì)環(huán)境溫度適應(yīng)性及抗藥性過(guò)程中的功能作用,為瓜實(shí)蠅綜合治理提供理論基礎(chǔ)。【方法】采用RACE-PCR技術(shù)克隆瓜實(shí)蠅的Hsp90基因cDNA序列,利用生物信息學(xué)工具分析序列特征,并通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)分析高溫脅迫、阿維菌素誘導(dǎo)和抗性及敏感品系中該基因的表達(dá)情況。【結(jié)果】克隆獲得的瓜實(shí)蠅Hsp90基因cDNA全長(zhǎng)2 654 bp,命名為Bc-Hsp90,GenBank登錄號(hào)為KP864677,含2 145 bp的開(kāi)放閱讀框,編碼715個(gè)氨基酸蛋白,具有HSP90蛋白家族共有模式和1個(gè)基序標(biāo)簽,C-末端具有MEEVD基序,屬于胞質(zhì)型熱激蛋白。系統(tǒng)發(fā)育分析顯示,Bc-Hsp90基因高度保守。不同高溫(32-40℃)脅迫處理1 h和2 h后,瓜實(shí)蠅成蟲(chóng)體內(nèi)Bc-Hsp90的相對(duì)表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組(26℃),并在38℃和40℃表達(dá)量最高;阿維菌素長(zhǎng)期篩選的RS品系,Bc-Hsp90表達(dá)量是對(duì)照SS品系的2.13倍,但RS品系以LC90劑量誘導(dǎo)后,Bc-Hsp90表達(dá)量顯著下調(diào),隨著恢復(fù)時(shí)間延長(zhǎng)其表達(dá)量逐漸升高,96 h后恢復(fù)到對(duì)照水平。【結(jié)論】推測(cè)Bc-Hsp90在瓜實(shí)蠅耐熱性和抗阿維菌素過(guò)程中可能起著重要作用。

關(guān)鍵詞:
  • 瓜實(shí)蠅  
  • 高溫脅迫  
  • 抗藥性  
  • hsp90  
  • 表達(dá)  
作者:
姜建軍; 黃立飛; 黎柳鋒; 陳紅松; 王鳳英; 楊朗
單位:
廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所; 廣西作物病蟲(chóng)害生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 南寧530007
刊名:
應(yīng)用昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)

注:因版權(quán)方要求,不能公開(kāi)全文,如需全文,請(qǐng)咨詢(xún)雜志社

應(yīng)用昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)緊跟學(xué)術(shù)前沿,緊貼讀者,國(guó)內(nèi)刊號(hào)為:11-6020/Q。堅(jiān)持指導(dǎo)性與實(shí)用性相結(jié)合的原則,創(chuàng)辦于1955年,雜志在全國(guó)同類(lèi)期刊中發(fā)行數(shù)量名列前茅。

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