摘要:【目的】熱激蛋白基因Hsps在生物體抗逆性過(guò)程中具有重要的作用,本文旨在通過(guò)闡釋瓜實(shí)蠅Bactrocera cucurbitae (Coquillett)熱激蛋白基因Hsp90在其對(duì)環(huán)境溫度適應(yīng)性及抗藥性過(guò)程中的功能作用,為瓜實(shí)蠅綜合治理提供理論基礎(chǔ)。【方法】采用RACE-PCR技術(shù)克隆瓜實(shí)蠅的Hsp90基因cDNA序列,利用生物信息學(xué)工具分析序列特征,并通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)分析高溫脅迫、阿維菌素誘導(dǎo)和抗性及敏感品系中該基因的表達(dá)情況。【結(jié)果】克隆獲得的瓜實(shí)蠅Hsp90基因cDNA全長(zhǎng)2 654 bp,命名為Bc-Hsp90,GenBank登錄號(hào)為KP864677,含2 145 bp的開(kāi)放閱讀框,編碼715個(gè)氨基酸蛋白,具有HSP90蛋白家族共有模式和1個(gè)基序標(biāo)簽,C-末端具有MEEVD基序,屬于胞質(zhì)型熱激蛋白。系統(tǒng)發(fā)育分析顯示,Bc-Hsp90基因高度保守。不同高溫(32-40℃)脅迫處理1 h和2 h后,瓜實(shí)蠅成蟲(chóng)體內(nèi)Bc-Hsp90的相對(duì)表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組(26℃),并在38℃和40℃表達(dá)量最高;阿維菌素長(zhǎng)期篩選的RS品系,Bc-Hsp90表達(dá)量是對(duì)照SS品系的2.13倍,但RS品系以LC90劑量誘導(dǎo)后,Bc-Hsp90表達(dá)量顯著下調(diào),隨著恢復(fù)時(shí)間延長(zhǎng)其表達(dá)量逐漸升高,96 h后恢復(fù)到對(duì)照水平。【結(jié)論】推測(cè)Bc-Hsp90在瓜實(shí)蠅耐熱性和抗阿維菌素過(guò)程中可能起著重要作用。
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