摘要:目的探討在絲素一殼聚糖(silk fibroin-chitosan,SFCS)支架上接種頜下腺細胞后,在大鼠體內構建組織工程化頜下腺的可行性及生物學特性。方法將36只8周齡SD大鼠分成實驗組和對照組,每組各18只。取1~3d齡sD大鼠頜下腺原代細胞培養、傳代、細胞來源鑒定后,將第二代細胞標記5-溴-2-脫氧尿嘧啶核苷(5’-BrdU),制備成5×10’個/L的頜下腺細胞懸液,將其接種于5mm×5mm×5mm的SFCS上,體外培養1周后將細胞一支架復合物植入實驗組,將單純SFCS支架植入對照組,分別于3、7、14d處死大鼠后取材,進行大體、組織學、免疫組織化學及掃描電鏡觀察。結果大體觀察:植人物表面被膜覆蓋,周圍組織反應較輕。組織學觀察:隨著培養時間延長細胞數逐漸增多,細胞黏附于材料表面或分散在支架內,聚集成集落、呈島狀排列,分泌粉染的細胞外基質。BrdU免疫組織化學觀察:術后3個時間點均存在陽性細胞。細胞角蛋白8(cytokeratin 8,CK-8)免疫組織化學觀察:術后3個時間點均存在陽性細胞,隨時間延長數目逐漸增多。掃描電鏡觀察:SFCS呈網狀結構,植入初期的頜下腺細胞呈圓形、表面光滑、散在的黏附于SFCS表面或網孔內;隨時間延長,頜下腺細胞表面凹凸不平,細胞數目增多,黏附于材料表面并伸出突起,細胞間相互接觸。結論利用SFCS支架接種頜下腺細胞后,可在體內構建組織T程化涎腺樣結構,為進一步進行組織工程化頜下腺的研究奠定理論基礎。
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