摘要:目的應用RNA干擾技術抑制人舌鱗狀細胞癌細胞株Tca8113中雙泛素(diubiquitin)的表達,探討雙泛素表達下調對舌鱗狀細胞癌細胞生物學行為的影響。方法構建針對雙泛素特異性小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)真核表達載體pu-雙泛素-siRNA,將其轉染至Tca8113細胞,采用反轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)、蛋白質印跡法檢測轉染后的Tca8113細胞中雙泛素的表達。通過流式細胞儀分析siRNA對舌鱗狀細胞癌細胞周期的影響,并通過細胞侵襲能力實驗觀察siRNA對Tca8113細胞惡性生物學行為的變化。結果siRNA干擾Tca8113細胞后,雙泛素的表達無論是在mRNA水平還是在蛋白質水平均顯著下降[mRNA:實驗組(0.36±0.03)、空白對照組(0.92±0.07)、空載體組(0.95±0.05);蛋白:實驗組(0.39±0.04)、空白對照組(0.64±0.05)、空載體組(0.69±0.05)](P〈0.05),細胞周期被阻滯在G.期,細胞生長緩慢,體外侵襲能力下降(P〈0.05)。結論通過RNAi技術阻斷雙泛素的表達,可抑制Tca8113細胞的生長、增殖、侵襲,提示雙泛素在舌鱗狀細胞癌的發生、發展過程中起重要作用。
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