摘要:為了對引起家禽重大經濟損失和具有公共衛生意義的 H5 亞型禽流感病毒(AIV)進行快速超敏檢測,本研究研制了針對HA蛋白的4株單克隆抗體(MAb)雜交瘤細胞株,通過MAb的兩兩配對試驗,以熒光量子點作為抗體標記生物材料,基于夾心法原理建立了H5 亞型AIV熒光免疫層析檢測試紙條。結果顯示,該方法能夠特異性檢測出 H5N1、H5N2等H5亞型AIV,而與H1N1、H3N2、H7N9、H9N2、NDV等其他病原無交叉反應;對標準檢測抗原 H5N1(Re-6)的最低檢測量為1ng/Ml,比市售H5亞型AIV膠體金檢測試紙條靈敏度高100倍;該方法的變異系數(CV)值在10%以內,與商品化的試劑盒檢測結果符合率達99.8%。本文建立的H5亞型AIV熒光檢測試紙條快速、敏感,檢測結果準確可靠,為 H5 亞型禽流感的流行病學調查和快速診斷提供了基礎。
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