摘要：目的探討在體外大量擴增CD8＋CD28一抑制性T淋巴細胞（Ts細胞）的方法，并檢驗其免疫調節作用。方法分離健康志愿者全血中CD8＋T淋巴細胞，在含不同細胞因子和異體抗原提呈細胞（APC）的培養條件下進行體外擴增。應用流式細胞術對擴增過程中CD28一細胞亞群的比例進行監測。分為3組進行混合淋巴細胞培養，反應細胞均為CD4’T淋巴細胞：B-Am組以來源于原致敏供者的APC作為刺激細胞，I-APC組以HLA-A、B、DR全錯配的無關供者的APC作為刺激細胞，Dynabeads組以包被有抗CD3和CD28單克隆抗體的免疫微球Dynabeads作為刺激細胞；擴增后的Ts細胞作為第三方調節細胞加入混合淋巴細胞培養中，測定其對CIN’T淋巴細胞增殖的抑制作用。結果在含白細胞介素2（IL-2）＋IL-7＋IL-15的培養條件下，CD8＋T淋巴細胞培養后CD8＋CD28T淋巴細胞亞群的比例最高（P〈0．05）。BAPc組不加入Ts細胞時，增殖的CD4＋T淋巴細胞比例為66．7％，當加入的Ts細胞與反應細胞的比例分別為0．5：1、0．1：1和0．02：1時，增殖的CD4＋T淋巴細胞比例分別為16．5％、34．1％和62．6％。Ts細胞對CIN’T淋巴細胞的增殖有明顯抑制作用，而在I—Apc組和Dynabeads組中，此抑制作用不明顯。結論應用含IL-2＋IL_7＋IL_15的培養條件聯合異體APC刺激可以在體外大量擴增Ts細胞，擴增所得Ts細胞在體外對供者CD4＋T淋巴細胞的增殖有明顯抗原特異性抑制作用。