摘要:目的 研究單純皰疹病毒2型(HSV-2)潛伏感染激活中潛伏相關轉錄子(LAT)開放讀碼框架(ORF)抑制后對LAT基因表達的影響。方法 建立HSV-2潛伏感染復發的神經細胞(SHSY5Y)模型。運用相差顯微鏡觀察HSV-2潛伏及激活后SH-SY5Y細胞形態的變化。對病毒在細胞中的潛伏及激發進行PCR驗證并測序。設計3對siRNA,激活誘導后轉染SH-SYSY細胞,相差顯微鏡觀察細胞形態變化,RT-PCR半定量檢測轉染前后LAT ORF表達的改變。結果在存在60 μmol/L阿昔洛韋(ACV)的環境,HSV-2在SH-SY5Y細胞中建立潛伏狀態。病毒在SH-SY5Y細胞中最長可潛伏14d。43℃ 1.5 h誘導病毒潛伏激發,而相差顯微鏡觀察發現,病毒激發后細胞病變從24h到72 h,細胞變性、壞死的程度、數量隨感染時間延長而增加。HSV-2 LAT、糖蛋白G(gG)基因PCR擴增及電泳結果證實病毒在細胞中的潛伏及激活。LAT ORF-siRNA轉染細胞后,LAT ORF mRNA的表達水平在轉染后24、36和48 h分別減少了39%、51%和60%。結論 抑制LAT ORF后能夠抑制HSV-2 LAT基因的表達,為進一步研究LAT ORF在病毒潛伏感染復發中的作用提供了依據。
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