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關鍵詞:煙草工業;物流;一體化服務;管理評價體系
中圖分類號:F426.8 文獻標識碼:A 文章編號:1001-828X(2014)09-0096-01
引言
隨著社會經濟的快速發展,煙草行業也在銷售、生產、物流方面尋求創新和進步。隨著行業競爭的加大和禁煙活動的進行,煙草行業面臨著空前挑戰。對煙草工業中的物流進行改進能夠在很大程度上提高煙草企業的競爭實力,建構煙草物流的行業標準和管理機制成為了提高煙草物流服務質量和管理效率的重要途徑。
一、一體化服務的概念
“一體化服務”是近些年來興起的概念,它是在“產品服務化”潮流中與“服務供應鏈”概念融合而被提出的,注重產品的服務性,重視行業供應鏈的整體互動。在對行業價值鏈進行優化時,還需要對物流服務后向一體化、橫向一體化和前向一體化進行革新,以使消費者、零售商、商業企業和工業企業的利益實現最大化。
二、煙草工業中的物流一體化服務評價管理體系
在煙草行業中推行一體化服務評價管理體系,對煙草行業具有重要影響。本文將對這一評價管理體系的模型和實施策略進行介紹。
2.1 煙草工業物流一體化服務評價管理體系模型
在對煙草工業物流一體化服務評價管理體系進行建立時,應引入“事前預警、事中控制、事后改進”的管理理念,應將改進、追溯、評價、規范等關鍵物流環節使用科學的管理方法連接起來,并將這一評價管理體系運用到整個煙草行業的管理服務中來。
煙草工業物流一體化服務評價管理體系模型包括三部分:智能追溯、服務考評、服務規范。這些環節在這個模型中都是很關鍵的,環環相扣,共同構成了一體化服務的管理理念。
在煙草的物流配送中,其配送中心的服務規范的意義在于:1.對煙草物流服務提出引導性規范,提出了“事前規范預警”,能夠在事前對物流服務進行規范;2.物流配送業務流程是與物流服務的評價是有密切聯系的,是以之為基礎構建起來的。能否成功實行服務考評制度,其關鍵在于要建立完善的評價指標體系,在供應鏈、KPI、平衡計分卡等理論的指引下,綜合煙草物流的特點以及ISO、服務規范等對物流服務的質量要求,建立起完善的、切實可行的評價方法。在服務評價結果的管理上,要對其評價結果進行追溯管理,以實現“事后改進”。
在這個服務評價管理系統中,構成了一個循環回路,后向環節以前向環節為基礎,前向環節依據后向環節進行改善,并提出改進方法和改進方向,不斷優化一體化服務體系,實現動態的服務評價管理。
2.2 管理體系中的重要環節
2.2.1 煙草行業物流規范
煙草行業物流規范中對煙草物流服務的質量和效率提出了合理科學的保障、警示、指導和支持。物流規范對煙草的“配送”、“分揀”、“倉儲”等環節都有重要的支持和規范作用,以基本完成物流服務任務為前提,對煙草工業中所涉及的物流環節的安全、人員培訓、投訴建議等都進行了流程和任務上的規定。煙草工業中的物流業務,不僅要從生產實際出發,還要對其可行性、全面性、細致性進行深入探討和研究,避免在管理中出現晦澀、片面和粗獷的管理方式,提升煙草物流一體化服務的質量。
2.2.2 煙草行業物流服務評價指標
服務評價指標是煙草工業物流一體化服務體系的核心,是對“事中控制”進行管理的主要標準,是實現一體化服務的關鍵所在。建立起來的一體化服務評價指標體系應該具有較為良好的定性指標和定量指標,具有較高的可比性、可行性和較為全面的評價標準。評價指標應以科學理論為導向,基于實踐,對煙草生產和配送過程中的物流服務進行管理。除此之外,還應注意對各項指標的細化,對應依據指標的性質和指標的巨細程度對指標進行合理細化,并標明合格標準與評判方法。
2.2.3 煙草行業評價結果與智能追溯管理
制定和實現物流一體化服務評價管理體系不是目的,而是一種手段,其目的在要提高煙草物流的質量,提升煙草物流的服務效率。在對該系統進行實施和改進時,應注重發現問題、分析問題、解決問題,注重對評價結果的追溯,尋找出物流效率提高或下降的原因,并給予合理和及時的解決。
三、實行煙草工業物流一體化服務評價管理系統的措施
在煙草物流中實施一體化服務評價管理體系,需要注意:
應該網絡信息技術,充分發揮計算機的功能,對管理實行標準化操作;
對管理實行智能化和自動化,開發和使用專用的物流軟件,對物流數據信息進行記錄、反饋、統計和分析;
聘用和培養綜合性與專業型人才,組建管理小組專門對物流服務的評價和組織進行管理。
方法:選取72例患者隨機分為兩組,對照組給予常規藥物和無創通氣治療,研究組在此治療基礎上加服益氣活血化痰的中藥。比較兩組治療后效果,包括動脈血氣中pH,PaCO2,PaO2的改善情況,綜合療效及住院天數。
結果:研究組總有效率為91.18%;對照組總有效率84.38%,兩組治療前后的pH無明顯變化,但研究組較對照組在PaCO2,PaO2指標的改善程度上要更為明顯,研究組的住院天數較對照組明顯縮短(P
結論:益氣活血化痰法聯合無創輔助通氣治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸衰竭患者,有效地借助中醫優勢,取得了中西醫互補的作用效果,提高了慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸衰竭治療的臨床效果。
關鍵詞:無創輔助通氣 益氣活血化痰法 慢性阻塞性肺病 呼吸衰竭
Doi:10.3969/j.issn.1671-8801.2014.11.532
【中圖分類號】R2 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801(2014)11-0314-02
慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并呼吸衰竭一直是臨床上的難治之癥,以往慣用有創機械為患者建立人工氣道,但鑒于有創機械存在的各種損傷和并發癥,患者也會承受一定的痛苦而備受爭議;無創機械通氣的雖能減少患者的不適感,但要想發揮療效,還得需要一定的呼吸中樞敏感性和呼吸肌的力量配合完成。本研究的目的借助中醫的手段,通過中西醫互補的方式對患者進行對照性的治療,通過治療手段和效果的比較,來提高治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸衰竭的臨床療效。具體是將益氣活血化痰法與無創機械通氣相配合治療對患者進行治療,對臨床療效、住院天數等數據進行比較,使中醫藥治療與機械通氣治療“雙劍合璧”,達到更為理想的治療效果。
1 資料與方法
1.1 一般資料。收集2011年9月至2012年12月在我院呼吸內科進行治療,符合臨床診斷標準的住院病人72例,隨機將病人分為兩組,研究組和對照組均為36例。研究組男27例,女9例,平均年齡71.43±7.6歲,其中包括11例I型呼吸衰竭,25例II型呼吸衰竭;對照組男30例,女6例,平均年齡72.7±9.5歲,其中15例I型呼吸衰竭,21例II型呼吸衰竭。兩組患者的平均年齡和性別分布無顯著性差異,P>0.05,具有可比性。
1.2 方法。兩組患者均服用抗生素、化痰藥及支氣管解攣劑等常規藥物,同時接受無創通氣治療。吸入氧的濃度為30%。每次通氣2小時,每天2次。
研究組在以上的治療基礎之上,還要同時服用活血化痰中藥和保元湯。主要成分包括黨參、茯苓、桔梗、黃芪、桑白皮、陳皮、法半夏、白術、補骨脂、杏仁、丹參、甘草、川芎。
每日開水沖服一劑,分3次服下,10天為一個療程。
1.3 觀察指標及判定標準。在治療前對兩組患者進行觀察,得到中醫證候積分 [2],同時測動脈血氣中的pH值,血液中氧氣分壓PaO2和二氧化碳分壓PaCO2。治療后的第3天和第10天以同樣方法進行測定,觀察動脈血氣是否改善、中醫證侯積分及患者住院天數的變化。
臨床判定的標準參照《中藥新藥臨床研究指導原則》來擬定 [3]。具體等級分為顯效、有效和無效。其中臨床癥狀及體征有明顯的改善,證候積分減少70%以上為顯效;臨床癥狀及體征均有好轉,證候積分減少30%以上的為有效;臨床癥狀及體征均無明顯改善,證候積分減少小于30%的視為無效。
1.4 數據處理。采用SPSS13.0統計軟件進行數據的分析,各項指標采用X±S表示,組間數據采用t檢驗。P
2 結果
2.1 兩組動脈血氣中pH,PaCO2,PaO2的比較。兩組患者在治療前后的pH無明顯差異;兩組治療后的PaCO2發生明顯降低,而PaO2發生明顯升高(P
2.2 中醫證候療效評價。兩組總療效的比較結果,研究組36例,顯效21例,有效12例,無效3例,總有效率為91.67%;對照組36例,顯效11例,有效16,無效9例,總有效率75%。兩組的臨床療效具有統計學差異。具體數據見表2。
2.3 住院天數比較。研究組住院天數15.92d,對照組住院天數19.21天,結果顯示研究組的住院天數明顯少于對照組,數據有統計學意義(P
表1 兩組動脈血氣中pH,PaCO2,PaO2的比較(X±S)
注:與0天相比,P
表2 兩組總療效比較(X±S)
注:與0天相比,P
3 討論
根據中醫學的觀點,氣虛是導致慢性阻塞性肺疾病反復發作的主要原因,瘀血和痰濁等癥狀則是慢性阻塞性肺疾病的主要病理因素。益氣活血化痰方配合保元湯就是針對患者氣虛的根源所擬定的中藥配方,方中君藥選用黃芪、黨參起到補益肺脾的作用;法半夏、茯苓、陳皮能夠起到化痰之功效;臣藥選擇丹參、川芎,能夠活血化瘀;配以宣肺化痰的桔梗,桑白皮、杏仁和甘草,將補氣藥與活血化痰藥進行了巧妙融合,達到標本兼治的目的。
本研究采用益氣活血化痰方配合無創機械通氣治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期的呼吸衰竭患者,與以往單純采用西醫常規藥物的治療方法相比,本方法具有更高的治療有效率,PaCO2和PaO2等血氣指標有較大程度的改善,不僅減少了患者的痛苦,也通過縮短患者的住院天數減輕其經濟負擔。說明中西醫結合的益氣活血化痰法配合無創機械通氣治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期呼吸衰竭的治療是有重要意義的。
參考文獻
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【摘要】 目的 研究分析青島地區EB病毒(EBV)相關胃癌及鼻咽癌組織中EBV主要潛伏期編碼基因啟動子甲基化狀態。方法 采用甲基化特異性PCR(MSP)及亞硫酸氫鹽基因組測序法(BGS),分析32例EBV相關胃癌及20例EBV陽性鼻咽癌標本中編碼EBV核抗原EBNAs基因的啟動子Cp、Wp、Qp以及LMP1和LMP2A編碼基因啟動子的甲基化狀態。結果 EBV相關胃癌及鼻咽癌腫瘤標本中EBV編碼基因啟動子的甲基化狀態與腫瘤細胞的潛伏感染類型一致:Cp和Wp呈高甲基化狀態,而Qp未發生甲基化;2種EBV陽性腫瘤標本中LMP1和LMP2A編碼基因啟動子甲基化狀態有所不同,兩者在EBV相關胃癌組織甲基化程度明顯高于其在EBV陽性的鼻咽癌(χ2=19.15、11.01,P
【關鍵詞】 皰疹病毒4型,人;胃腫瘤;鼻咽腫瘤;DNA甲基化;啟動區(遺傳學)
[ABSTRACT] Objective To study and analyze the methylation status of major EpsteinBarr virus (EBV) latency promoters in EBVassociated gastric carcinoma (EBVaGC) and nasopharyngeal carcinoma (NPC) in Qingdao area. Methods Methylation status of specific CpG sites of Cp, Wp, Qp, LMP1 promoter (LMP1p) and LMP2A promoter (LMP2Ap) was systematically detected in 32 EBVaGCs and 20 NPCs by bisulfite genomic sequencing (BGS) and methylationspecific PCR (MSP). Results The methylation status of these promoters in EBVaGC was consistent with NPC. Wp and Cp were hypermethylated, whereas Qp was unmethylated; The methylation status of LMP1p and LMP2Ap in EBVaGC was different from NPC: the methylation rates of LMP1p and LMp2Ap in EBVaGC were significantly higher than those in NPC (χ2=19.15,11.01;P
[KEY WORDS] herpesvirus 4, human; stomach neoplasms; nasopharyngeal neoplasms; DNA methylation; promoter region (genetics)
EB病毒(EBV)屬皰疹病毒科γ皰疹病毒亞科成員,95%以上健康成人攜帶EBV,與人類多種腫瘤如鼻咽癌、BURKITT淋巴瘤、HODGKIN病、胃癌等密切相關[12]。不同EBV相關腫瘤組織和EBV陽性細胞系中病毒基因的轉錄表達形式有所不同,在EBV潛伏感染細胞中,可表達的病毒基因有10多種,如EBV核抗原(EBNA)1、2、3A、3B、3C和LP,潛伏膜蛋白(LMP)1、2A和2B,EBV編碼的小RNA(EBER)1和2以及BARF0的轉錄產物。根據EBV潛伏期基因表達形式不同分為潛伏Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型3種潛伏類型。EBV相關胃癌和BURKITT淋巴瘤組織均可以檢測到潛伏期基因EBNA1、EBERs、LMP2A、BARF0的轉錄表達,為潛伏Ⅰ型。除了上述基因以外,在鼻咽癌組織、HODGKIN病中還可檢測到LMP1的表達者為Ⅱ型潛伏。體外EBV永生化的B淋巴母細胞系(LCL)可檢測到包括6種EBNAs和3種LMPs等在內的大部分EBV潛伏期基因的表達,稱為Ⅲ型潛伏。研究表明,EBV相關胃癌及鼻咽癌組織中病毒基因表現為限制性表達,推測EBV可能通過表觀遺傳機制調控病毒基因啟動子,尤其是通過其甲基化狀態來調控病毒基因的表達[3]。研究顯示,EBV編碼基因啟動子序列中CpG位點甲基化可抑制相應基因的表達,但這些研究主要集中在淋巴細胞來源的EBV陽性腫瘤和細胞系。本實驗選擇上皮來源的EBV相關胃癌和EBV陽性鼻咽癌作為研究對象,檢測其EBV主要潛伏期基因啟動子甲基化狀態,為深入探討EBV相關腫瘤的發生機制及防治提供實驗基礎。
1 材料和方法
1.1 細胞系
EBV陽性Akata、Raji和B958細胞系由日本鳥取大學醫學部生體情報學教室西連寺剛教授惠贈,分別為潛伏Ⅰ型、潛伏Ⅲ型Burkitt淋巴瘤細胞系,EBV永生化的潛伏Ⅲ型LCL細胞系用作該實驗的對照細胞。上述細胞用含有體積分數0.10的胎牛血清、105 U /L青霉素和100 mg /L鏈霉素的RPMI 1640營養液,于37 ℃、體積分數0.05的CO2培養箱中培養。
1.2 腫瘤標本
新鮮胃癌組織和石蠟包埋鼻咽癌組織取自青島大學醫學院附屬醫院﹑蓬萊市人民醫院和煙臺毓璜頂醫院。采用原位雜交檢測石蠟組織切片中EBV編碼的小分子非多聚腺苷酸EBER1的轉錄[4],篩選出32例EBV陽性胃癌和20例EBV陽性鼻咽癌標本。
1.3 DNA提取
采用酚氯仿異戊醇抽提法常規提取新鮮胃癌組織DNA,采用QIAamp DNA FFPE試劑盒提取石蠟包埋鼻咽癌組織DNA,具體操作步驟按試劑盒(QIAamp tissue kit, Qiagen, Hilden, Germany)說明進行。
1.4 DNA處理
取30 μL上述提取的組織DNA (2~5 μg),加33 μL新鮮配制3 mol/L的NaOH溶液混勻變性,置37 ℃水浴15 min;將新鮮配制的亞硫酸鹽溶液(2.4 mol/L 亞硫酸鈉,pH 5.0~5.2;0.5 mmol/L 氫醌與3 mol/L NaOH的混合液)333 μL加入變性DNA中進行修飾,55 ℃避光孵育4 h。修飾后的DNA脫鹽純化處理按照DNA純化試劑盒(Qiagen, Hilden, Germany)說明操作步驟進行;脫鹽純化的DNA溶于50 μL TE緩沖液中,室溫下靜置5 min。再加入3 mol/L的NaOH 5.56 μL,37 ℃水浴15 min,使其脫磺化基團。將純化后DNA溶解于100 μL TE緩沖液中,-20 ℃保存備用[5]。
1.5 甲基化特異性PCR(MSP)
以亞硫酸氫鹽修飾的組織DNA作為模板進行MSP,甲基化特異性引物、未甲基化特異性引物以及MSP產物大小見表1,其中Wp和Cp特異性引物參考文獻[56]設計,Qp、LMP1 和 LMP2A啟動子特異性引物采用MethPrimer軟件進行在線設計。 PCR反應體積為25 μL,包括DNA模板2 μL,1.25 U熱啟動酶TaKaRa,1.5 mmol/L MgCl2,0.2 nmol/L dNTP 和0.6 mmol/L引物。反應條件:95 ℃預變性5~10 min;然后95 ℃變性30 s,最適溫度退火30 s,72 ℃延伸1 min,共38個循環;最后72 ℃延伸10 min。擴增產物置20 g/L的瓊脂糖凝膠上電泳,紫外線凝膠成像系統記錄分析結果。EBV陽性Akata、Raji和B958細胞系DNA 作陽性對照,EBV陰性Ramos細胞DNA作陰性對照。
1.6 亞硫酸鹽基因測序
為進一步檢測LMP1和LMP2A啟動子區域CpG位點具體甲基化狀態,并驗證MSP結果,參考文獻設計引物行亞硫酸鹽基因組測序(BGS)[78],該引物序列位于MSP引物序列外側,見表2。PCR反應體積為25 μL,包括亞硫酸氫鈉修飾的DNA模板2 μL,1 U熱啟動DNA聚合酶TaKaRa,1.5 mmol/L MgCl2,0.2 nmol/L dNTP和0.6 mmol/L 引物。反應條件:95 ℃預變性5 min;然后95 ℃變性30 s,最適溫度退火30 s,72 ℃延伸1 min,共38個循環;最后72 ℃延伸10 min。擴增產物置20 g/L的瓊脂糖凝膠上電泳,紫外線凝膠成像系統觀察結果后送測序。表1 甲基化特異性PCR引物啟引物類型核酸序列表2 BGS測序引物引物類型核酸序列B958對應序列退火溫度
1.6 統計學分析
采用PPMS 1.5[9]統計軟件進行統計學分析,計數資料的比較采用校正χ2檢驗及χ2檢驗。
2 結 果
2.1 Cp、Wp及Qp甲基化檢測
MSP檢測結果顯示,B958細胞中未檢測到Cp的甲基化,Raji細胞中Cp高甲基化,但在Akata細胞系中同時檢測到甲基化和未甲基化的Cp。Raji和Akata細胞系中Wp呈高甲基化,但在B958細胞系中則呈部分未甲基化現象;3種細胞系中均未檢測到Qp的甲基化。本實驗檢測的52例EBV陽性腫瘤組織均表現為Cp和Wp高甲基化狀態,而Qp呈低甲基化狀態。MSP檢測3種細胞系和部分EBV陽性標本Wp、Cp及Qp甲基化狀態的電泳結果見圖1~3。
2.2 LMP1基因啟動子甲基化檢測
MSP檢測結果顯示,32例EBV相關胃癌組織中LMP1啟動子均呈高甲基化狀態;20例鼻咽癌標本檢測到3種MSP結果類型,其中包括M型9例(45%)、U型6例(30%),M+U型5例(25%),結果見表3。圖4為MSP檢測2種EBV陽性細胞系和部分EBV陽性標本LMP1啟動子甲基化狀態的電泳結果。BGS檢測結果顯示:B958和Akata細胞系LMP1編碼基因啟動子區的25個CpG位點均沒有發生甲基化;EBV陽性腫瘤組織的檢測結果與MSP結果基本一致,除N43外,其余標本該區域25個CpG位點呈甲基化狀態。見表4。
2.3 LMP2A基因啟動子甲基化檢測
MSP檢測結果表明,在84.38% (27/32)EBV相關胃癌和40%(8/20)的鼻咽癌標本中,LMP2A編碼基因啟動子表現為高甲基化,結果見表3和圖5。BGS檢測的結果顯示,B958和Akata細胞系LMP2A編碼基因中啟動子區的20個CpG位點均沒有發生甲基化;EBV陽性腫瘤組織的檢測結果與
Q7、Q31、Y13A 為EBV陽性胃癌標本,N31、N43為EBV陽性鼻咽癌標本,Akata、Raji、B958為EBV陽性細胞系。M代表采用甲基化特異性引物M1/M2的PCR結果,U為采用甲基化特異性U1/U2引物的PCR結果。表3 MSP檢測EBV編碼基因啟動子甲基化狀態啟動子類型甲基化類型EBVaGC(例)EBV陽性NPC(例)
MSP檢測結果基本一致。見表4。BGS測序結果證實,5例MSP結果呈U+M的EBV陽性腫瘤標本(Q215、DA53、DA78、DA93和N36)中,LMP2A啟動子區域CpG位點呈部分甲基化。在3例EBV陽性胃癌標本(DA53、DA78和DA93)中,LMP2A編碼基因部分CpG位點存在2種不同的甲基化形式,即甲基化(C)與未甲基化(T)同時存在(圖6)。
2.4 LMP1和LMP2A基因啟動子在EBV陽性胃癌和鼻咽癌中的甲基化率
EBV陽性胃癌組織中LMP1和LMP2A基因啟動子甲基化陽性率明顯高于鼻咽癌組織,差異有顯著性(χ2=19.15、11.01,P
圖5 MSP檢測LMP2A編碼基因啟動子甲基化電泳結果
圖中序列276對應表4中的CpG位點是14,287對應的CpG位點是15,310、313、315對應的CpG位點分別是16、17、18。如圖所見位點14、15存在兩種波峰,提示C與T同時存在;位點16、17、18僅一種波峰,即C。表5 EBV陽性胃癌和鼻咽癌中LMP1p和LMP2Ap甲基化率的比較組 別nLMP1p陽性(例)陰性(例)甲基化率
3 討 論
基因表達調控區域的DNA序列發生化學修飾可影響基因表達,DNA甲基化是最重要的修飾形式之一。本實驗證實,EBV相關胃癌和EBV陽性鼻咽癌組織中,病毒基因表達調控區DNA的甲基化與EBV潛伏期基因的表達密切相關。
編碼EBV核抗原EBNAs的啟動子包括Wp、Cp和Qp,其中Wp和Cp為EBNAs的共同轉錄啟動子,可轉錄合成全部6種EBNAs mRNA,而Qp為EBNA1的專有啟動子,選擇性轉錄合成EBNA1 mRNA。EBNAs在EBV相關胃癌及鼻咽癌組織中表達類型相同,僅EBNA1表達,其表達受Cp、Wp和Qp等3種啟動子調控[10]。實驗證實,Wp和Cp引物序列所含CpG位點的甲基化狀態可很好地反映啟動子的甲基化狀態[56]。本研究MSP檢測結果顯示,在EBV相關胃癌及鼻咽癌組織中Wp和Cp表現為高甲基化,而Qp則未發生甲基化,表明潛伏Ⅰ和Ⅱ型EBV陽性腫瘤組織中EBNA1的表達由未甲基化的Qp啟動[1112]。由此可見,啟動子區域CpG位點甲基化狀態與EBV基因表達密切相關,并呈反向關系,即DNA甲基化一般抑制基因表達;而非甲基化一般與基因的活化相關。
通常認為在潛伏Ⅲ型細胞系中,EBNAs的表達受Wp/Cp調控,而Qp處于沉默狀態。本實驗結果顯示,在B958細胞系中Wp、Cp和Qp均呈低甲基化狀態,表明EBNA1的表達由三者共同調控,其他EBNAs的表達則由Wp/Cp調控。研究證實,Raji細胞所有Ⅲ型潛伏基因均表達,理論上6種EBNAs mRNA的轉錄表達是由Wp/Cp啟動,但本研究顯示Raji細胞系中Wp和Cp呈高甲基化狀態,提示EBNA1的表達受Qp調控,其他EBNAs的表達不受Wp/Cp調控,推測Raji細胞系中EBNAs的表達存在其他調控機制。研究顯示,EBV陽性BL細胞系在體外培養時易發生表型改變,如EBV核抗原表達的改變,早期傳代病毒基因表達呈高度限制性,僅EBNA1表達;隨著傳代次數的增多晚期至少表達9種不同的病毒蛋白(EBNA1、2、3A、3B、3C,LP,LMP1、2A、2B)[1314]。我們的結果也顯示,Akata細胞系Cp區域有少量CpG位點未發生甲基化,而且Akata細胞系LMP1和LMP2A編碼基因啟動子的甲基化狀態也反映出其在體外培養過程中發生了表型改變。推測體外細胞培養條件與人體內環境明顯不同,缺乏免疫監視,對細胞系的研究可反映但不能代表原始腫瘤組織中EBV主要潛伏期編碼基因啟動子的甲基化狀態,因此有必要對原始腫瘤組織標本進行研究。
BGS檢測LMP1和LMP2A啟動子區域CpG位點甲基化結果表明,2種上皮來源的EBV陽性腫瘤組織中存在病毒基因啟動子不完全甲基化現象。1996年,ROBERTSON等[14]在對EBV陽性BURKITT淋巴瘤和HODGKIN病腫瘤組織中Cp甲基化狀態進行研究時就發現存在不完全甲基化現象。我們的前期研究結果也證實,LMP1和LMP2A在EBV陽性胃癌組織中表達不同,其中LMP1不表達,而LMP2A僅在部分標本中表達[15]。FAHRAEUS等[16]采用免疫印跡法檢測到LMPs在約71%鼻咽癌組織(標本來源中國)中表達。本研究結果顯示,2種EBV陽性腫瘤組織中LMP1和LMP2A編碼基因啟動子的甲基化狀態有所不同,在EBV相關胃癌標本所有的LMP1基因啟動子和絕大部分(27/32)LMP2A編碼基因啟動子呈高甲基化狀態;而在鼻咽癌組織中,LMP1和LMP2A編碼基因的甲基化程度明顯下降,高甲基化率分別為45%和40%,表明EBV相關基因調控區域DNA甲基化狀態是基因表達的重要調節機制之一。BGS檢測結果所示的部分EBV陽性胃癌組織標本中部分CpG位點U與M同時存在,我們推測其原因有兩種:一是等位基因甲基化情況不一致;二是病毒基因組DNA甲基化狀態不同(病毒部分DNA甲基化而另一部分DNA未甲基化)。
總之,EBV陽性胃癌及鼻咽癌組織中,EBV主要潛伏期編碼基因啟動子區域CpG位點甲基化狀態與其表達呈負相關,EBV基因的高甲基化狀態有助于其逃避免疫活性個體的免疫系統的監視,并長期存在宿主細胞內,其在腫瘤的發生、發展中的具體作用機制有待于進一步研究。
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中考生:補習弱項是關鍵
專家建議,寒假中,要客觀地對期末考試試卷進行分析,看看哪些題失了分,弄清失分原因。寒假學習中要多補習“瘸腿科目”,對薄弱環節進行分析,哪科沒考好,冷靜分析原因,判斷該科是不是弱科。如果是,則要抓緊寒假時間,多補弱科基礎知識,避免中考時“瘸腿科目”拉分。另外假期既不要睡懶覺,也不要開夜車,要制定一個學習計劃,以保證每科的學習時間,每天至少進行三科的復習,文理分開,擅長、喜歡和厭惡的科目交叉進行。記住,完成作業不是目的,根據作業查漏補缺,或翻書再復習一下薄弱環節才是根本。有解決不了的問題,千萬不要鉆“牛角尖”或置之不理,可以打電話請教一下老師或同學。
針對英語的復習,成績落后生要靜下心來,加強概念、單詞和公式的記憶,盡量多做歷年中考真題。在做完一套真題試卷后,要及時核對答案,看看哪些題目丟分,弄清丟分原因。通過做真題可了解中考命題范圍、題目深淺以及相關題型。同時,還要把做錯的題記錄在錯題集里,或用紅筆做上記號,便于下一次復習。通過有選擇性地做中考真題,可以體會和熟悉中考題型,同時對所學知識的“融會貫通”,使訓練更有效。
高考生:鞏固提高是關鍵
高三學生對最后一個寒假應該持何種態度,才能最大程度有利于備戰高考呢?寒假是高三生自我調整、鞏固提高的關鍵時期。寒假里,考生的學習將由在校時的被動學習變為完全靠主動學習。因此,考生要制訂一套合適的學習計劃和假期作息時間表,做到復習有計劃,生活有規律。假期復習計劃一方面包括學習知識內容的計劃,;另一方面還包括整個假期的時間安排。以往,很多考生放假后早上不吃飯,睡懶覺,盡情地放松,平時的生物鐘完全被打亂。開學后,這些考生很難適應正常的作息時間,從而直接影響了新學期的復習狀態。專家認為,高三生在制訂一份詳細的作息時間表時,要把每天的學習任務、時間具體化。高三生寒假里要保持正常的作息時間,每天上午學習3個半小時,下午學習兩個半小時。另外,每天還要堅持看半小時的新聞時事(電視或報紙),并留出半小時的體育鍛煉時間。
家長:要保證孩子張弛有度
寒假期間,學生和家長相處的時間多了起來。一些老師建議,假期中高考生的家長別忘幫助孩子制定明確學習目標,督促孩子進行體育鍛煉。
新思路的專家提醒家長,家長要督促孩子完成好老師布置的作業,根據實際情況選擇一些家教、輔導班,但要注意不要把孩子的假期安排得過于緊張,要給孩子一個張弛有度的假期。這個寒假,高三和初三的學生進入了“休整期”,不論平時成績如何,高三和初三的每一個學生都有潛力。為什么有相當多的學生的潛力沒有發揮出來?一個最主要的原因是心理素質不高。有的學生平時成績很不錯,但是一旦某次測驗成績不理想就一籌莫展,甚至想休學、退學、降級,家長和老師的規勸無濟于事。也有的高三學生,為了迎接高考,家長硬逼著學習,晚上學到12點,早晨4點就起床,但仍沒能考上理想的大學。家長認為只要學習時間長效果就會明顯,殊不知這樣卻違背了大腦的運轉規律。
一、加強教學管理,規范教學行為
1、嚴格崗位職責,加強教學常規檢查。根據《肥城市初中學校教學管理規范和實施細則》,嚴格教學崗位、教學環節的檢查巡視,杜絕隨意空課、調課、占課、拖課現象,保證教學各項工作科學、規范運轉。
2、科學制定計劃,精心安排復習。要督促廣大教師根據教學進度,及時結束新課,科學安排復習。學校要對各個學科、各位教師的復習計劃進行督查,強化復習期間的教學秩序管理,切實杜絕隨意性、放鴨式復習,確保復習的目的性、針對性、有效性,提高復習效益。
二、優化教學策略,提高教學效益
3、上好復習課,努力提高課堂效益。要重視復習課教學策略的研究,加強對復習課教學目標、教學重點、教學方法、實施策略等具體問題的研討,努力通過凝聚集體智慧,構建自主高效的復習課教學操作模式,強化知識的聯系,促進知識的遷移,實現能力的提升,充分激發學生的潛能,激活學生的思維,提高課堂45分鐘的質量效益。
4、嚴禁題海戰術,精細教學質量監控。要堅決摒棄靠題海戰術、機械重復式作業提高質量的做法,努力優化提升習題、試題及作業水平,提高單位時間效益。各學校、各學科要把習題、試題和作業研究作為一個重要的課題,聚力聚智,常思常探,切實優化題目設計,精心作業布置,及時測試講評,保證做到精練精批,反饋高效。
三、減輕學生負擔,促進身心兩健
5、加強作業研究,嚴格控制作業量。各單位要認真執行省規40條,嚴格控制作業量,保證學生充足的睡眠時間,杜絕超時超量布置校內作業和家庭作業,杜絕過量使用成套的單元試卷,杜絕盲目使用教輔資料,確實把作業的數量降下來,把作業的實效提上來。因作業量的問題引發社會及家長不滿造成不良影響的,將追究學校領導及相關教師的責任。
6、加強生活指導,力促學生和諧發展。廣大教師既要關注學生的學習狀況,更加關注學生的身心健康。因此,要重視并加強學生的學習指導研究,引導學生科學合理地安排作息時間、調節心理,做到勞逸結合,身心兩健,以良好的狀態迎接期末考試。
四、科學統籌安排,部署好考試和放假工作
7、加強考風建設,發揮考試效能。各單位要利用主題班會,加強考風考紀建設,教育學生誠信考試。要充分發揮考試的診斷、激勵和發展功能,認真評卷,做好成績統計和質量分析,指導教師寫好試題評價報告,在放假前做好試卷的講評和修改完善。
一、科學合理地制定暑假活動計劃
假期中任務繁多,想做的事情也很多。要把這些事情逐一篩選、調整,根據暑期時間合理安排,制定一份“暑假活動表”。一切活動應該嚴格按照“計劃表”進行,但還是要注意勞逸結合。
二、認真復習,迎接獎學金考試
這個測試是暑假后初一下學期的一個總結,暑假中,要把初一下學期學習的所有內容認真復習一遍,還要制定一個“復習計劃表”。爭取測出好成績。
三、培養自己的興趣愛好,發展自己的特長
根據自己的興趣愛好,積極參加學校組織的各種興趣小組,如:繪畫、書法、音樂、英語、信息技術,掌握一技之長,為將來的發展打下基礎。
四、勤奮讀書,注意積累,善于寫作,靈活運用
【關鍵詞】SO2;標準溶液;溫度控制
測定環境空氣中的SO2,一般采用HJ 482-2009《環境空氣 二氧化硫的測定 甲醛緩沖溶液吸收―鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法》,該法主要測試原理是環境空氣中的SO2通過采集器被甲醛緩沖溶液吸收后,生成穩定的羥基甲磺酸加成化合物,在樣品中加入氫氧化鈉溶液使加成化合物分解,釋放出的SO2與鹽酸副玫瑰苯胺作用,生成紫紅色化合物,根據顏色深淺,用分光光度法測定。相比其他分析方法,甲醛法所用試劑無劇毒,價廉易得;對低濃度二氧化硫采樣吸收率高;標準溶液和樣品溶液穩定性好,即使在室溫條件下也可長時間保持不易降解損失;采樣吸收液的最佳溫度范圍寬比汞法易于控制等特點。缺點是:采樣和分析技術雖然易于掌握,但是具體操作繁瑣,對監測人員素質要求高。當前二氧化硫測定頻繁,以建設項目環境現狀監測為例,一個空氣監測點位每天需測定一個日均值和四個小時值,如果監測點位較多,加上測定過程繁瑣,監測人員難免會在實驗中出現紕漏,影響分析結果。
《環境空氣二氧化硫的測定甲醛緩沖溶液吸收―鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法》(HJ 482-2009)對采樣和實驗室分析的各個流程做出了詳細的規定,并且放寬了校準曲線斜率的要求,相比《環境空氣 二氧化硫的測定 甲醛緩沖溶液吸收―鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法》(GB/T 15262-94)難度有所降低,但是在實際操作中,對監測人員仍有較大難度,還有很多需要注意的地方,經長期開展實驗工作證明,采取一定的措施,可以有效降低實驗難度,提高數據準確性。
1、外購標準溶液降低實驗難度
制備二氧化硫標準儲備液,需要對亞硫酸鈉溶液進行標定,然后計算二氧化硫標準儲備液的質量濃度,整個標定過程十分重要,是關系到測定數據準確性的關鍵步驟。標定過程需要對硫代硫酸鈉標準儲備液和亞硫酸鈉溶液進行標定,其操作過程和計算公式都較為復雜。我們由于人員缺乏和實驗頻率加大等原因,經過過成本核算,逐步開始采用環境保護部標準樣品研究所生產的二氧化硫標準溶液進行試驗,用手工配制標準溶液和外購標準溶液做出的校準曲線進行比對,兩種溶液各做校準曲線20條,其中A0和a值都滿足要求,外購標準溶液繪制校準曲線斜率在0.044±0.002范圍內,手工配制標準溶液繪制校準曲線斜率18條在0.044±0.002范圍內,另外兩條在0.040~0.042范圍內,全部40條校準曲線都滿足HJ 482-2009標準關于質量保證和質量控制的要求。由于標準溶液濃度為100μg/mL可保存一年,濃度為10μg/mL可保存3個月,濃度為1μg/mL僅可保存1個月,可見高濃度的標準溶液更利于保存。同時,也應采購標準密碼樣品做為質控樣品,對實驗進行質量控制,進一步提高監測結果的準確率。因此,采用外購標準溶液開展實驗,可以減少很多繁雜操作,并能得到很好的實驗效果。
2、嚴格控制溫度和時間。
《環境空氣 二氧化硫的測定甲醛緩沖溶液吸收―鹽酸副玫瑰苯胺分光光度法》(HJ 482-2009)表2中對顯色溫度和顯色做出了相應的規定,魏卓立、曹威等人通過實驗表明在18℃下,顯色7分鐘時,顯色反應已進行完全,即可進行比色。但是通過實際工作中,發現在繪制校準曲線的時候,如果顯色時間不充分,高濃度二氧化硫試樣測得吸光值偏低,特別在低溫度條件下,會影響到整個校準曲線的斜率值。因此建議在繪制校準曲線和測定高濃度樣品的時候,應嚴格按照要求,給足顯色反應的時間。同時,由于顯色溫度30℃的時候穩定時間僅為10分鐘,因此在測試樣品較多的情況下,有條件的實驗室應該配備空調控制室溫,沒條件的實驗室應嚴格控制水浴鍋溫度,使顯色溫度和室溫保持3℃之內的差距。在室溫較高情況下,若測定樣品較多,須分批次檢測,嚴格控制比色用時,以免影響測定結果。
3、玻璃儀器的清洗
實驗生成的紫紅色化合物不易清洗,在洗滌比色管的時候應認真仔細,避免PRA溶液殘留,可以采用溫水洗滌,加速顯色反應,以顏色判定是否有殘留試劑,同時還應避免用硫酸-鉻酸洗液洗滌玻璃器皿,以免產生負干擾。由于因樣品中SO2的含量差別較大,每次在測定時,都需認真清洗專用比色皿,使用前必須用蒸餾水和待測溶液對其進行認真清洗,以免樣品之間產生干擾。
4、結論
(1)鑒于二氧化硫標準儲備液標定過程非常繁瑣,可外購標準溶液繪制校準曲線,大幅度簡化實驗步驟,配合外購密碼樣品,提高測試結果的準確度。
(2)溫度控制是實驗成功的關鍵條件之一,應當十分注意。應嚴格按照相關要求開展實驗。
(3)實驗產生的紫紅色化合物應及時清洗,以免產生干擾。
參考文獻
此外,在新學期開學之前,要好好的梳理一下上個學期學習的東西,為學習新知識做好準備。當然能夠提前預習一下新學期的內容更好,但如果時間不充裕,復習比預習更重要。因為畢竟新內容老師會在課堂上講,而上個學期的東西,可能要一直等到畢業總復習的時候才會再講了。
接下來提分君為大家詳細介紹一下要如何安排寒假的學習計劃:
進行分析與定向,攻克薄弱環節
寒假畢竟不長,目標不宜太大、復習范圍不宜太廣。如果想真正有收獲,一定不要貪多喲!適宜重點攻克薄弱學科、或某學科中的重點內容。重點夯實基礎知識,查漏補缺,為考試打好堅實的基礎!
在制定寒假復習計劃之前要科學、準確地自我解剖、自我分析這一學年的學習狀態即考試成績,包括平時系列測試、期中考試成績、期末考試成績,其中以期末考試成績為主,因為期末考試的信度比較高。
自我分析的目標包括兩個方面,一是定位,二是定向。所謂定位,就是說期末考試后,全區有一個成績統計,每個學生都可以知道自己總分的位置,你處在一個什么位置上?心里要十分清楚,這基本反映了你的實力。所謂定向,就是說你的優勢學科是什么?你的弱勢學科是什么?薄弱環節在哪兒?優勢學科的優勢原因是什么?
具體建議:沒有舍棄就沒收獲!基礎薄弱考生要記住:弱就弱在基礎上!所以寒假的學習要抓基礎知識、基本技能、基本方法。要抓非智力因素、信心、目標、意志、毅力、方法、心態。要多練,特別是中低檔試題,要看、要想更要練。
合理規劃時間,制定學習計劃
放假后的第一件事,應該是整理出可利用的時間,做出時間安排表,以每一天為單位;接下來梳理自身學習情況,找出最需要提高或最想做的事,合理分配復習和預習時間,有針對性地制定假期學習計劃。
每天有效學習時間最好保持在5-6個小時。可以根據自己的情況合理的規劃一下,例如:早上2個半小時,中午2個半小時,晚上1個小時。學習時間最好固定在:上午8:30-11:30,下午14:30-17:30;晚上19:30-21:30。習慣比聰明更重要!只要你按照計劃來,每天堅持,你的成績不會沒有進步的!相信你的假期一定會有意想不到的收獲。下面是幾個小Tips,供大家參考:
1、早晨合理安排30分鐘讀一讀英語
2、利用上午2節課的時間分別獨立完成2科寒假作業
3、中午適當午休,既不要睡懶覺,也不要開夜車。
4、和上午一樣,利用下午的時間做些寒假作業,但不可一下子貪多。要均衡、科學安排。
5、自由時間可以干一些喜歡的事情,但要控制在半小時的時間里。
6、晚飯之前是自由活動的時間,可以看電視等,但要看看新聞。
7、讀一些好的小文章,寫日記或是讀后感,或是精彩的摘抄
8、制定學習計劃,主要是以保證每科的學習時間為主。若在規定的時間內無法完成作業,應趕快根據計劃更換到其他的學習科目。千萬不要總出現計劃總是趕不上變化的局面。
9、晚上學習的最后一個小時為機動,目的是把白天沒有解決的問題或沒有完成的任務再找補一下。
10、每天至少進行三科的復習,文理分開,擅長/喜歡和厭惡的科目交叉進行。不要前趕或后補作業。完成作業不是目的,根據作業查缺補漏,或翻書再復習一下薄弱環節才是根本。
11、一定要預留出鍛煉身體和休閑活動的時間。
大家上午好!今天,我演講的題目是《期末考試,你準備好了嗎?》時光荏苒,不經意間,五個月的時間轉瞬即逝,本學期已經接近尾聲,同學們馬上就要迎來本學期的期末考試,相信同學們此時內心情緒會比較復雜。想到父母和老師殷切期望的眼神、想到同學們拼搏競爭的氣勢,同學們內心可能會有一些緊張;想到展現自我、驗證自我的時刻即將到來,同學們可能會有一些興奮;想到期末考試后那美好的假期,同學們可能也會有一些期待。期末考試的戰鼓已經敲響,考驗我們的時刻即將來臨。同學們,你們準備好迎接挑戰了嗎?在此,我想對同學們提出以下幾點建議。
一、端正態度,正確認識期末考試同學們要首先意識到,期末考試是對本學期學習情況的總結和檢驗,通過考試,使每位同學發現自己的學習態度、知識、方法等方面存在的問題,以便在下學期的學習中做出相應的調整,采取相應對策。另外,期末考試是對我們一種磨煉,考試,是每個學生必經之旅,在這個過程中,我們的意志在磨練和忍耐中變得堅強,我們的思想在經歷和壓力中走向成熟。因此,期末考試是促進我們成長、進步的重要階梯,我們要將期末考試看做鍛煉自己、考驗自己的好機會,要以一種平和的心態應對期末考試。
二、制定計劃,有側重地復習《禮記》言:“凡事預則立,不預則廢。”是指不論做什么事,事先有計劃有準備,就更容易獲得成功。高中課程繁雜,考試科目眾多,尤其是期末考試,往往是對一整個學期學習效果的考察,考察范圍廣知識多。同學們首先要緊跟老師步伐,按照老師的要求和計劃有序復習,這樣才能抓住復習重點,不至于在茫茫學海中迷失方向。另外,由于個體差異的存在,每個同學也需要給自己量身打造一個個人學習計劃。仔細分析自己的優勢學科是什么,薄弱學科是什么,尤其要針對薄弱學科制定出背誦、做題等復習計劃。計劃要制定得合理,要有可行性,當然,更重要的是要嚴格按照計劃復習,要將計劃落到實處,絕不能做“思想的巨人,行動的矮子”。高中生活固然緊張,而有心人總能擠出瑣碎時間加以利用,長期堅持,必有成效。“騏驥一躍,不能十步;駑馬十駕,功在不舍。”按照計劃穩扎穩打,敢于下苦功夫、笨功夫的人,方能有所收獲。
三、科學復習,事半功倍科學有效的方法,可以讓我們的復習、應考事半功倍。古人云:“取法乎上,僅得其中;取法乎中,只得其下。”講的就是做任何事情都要講究科學有效的方法。首先,要重視基礎、不犯概念性錯誤。教材中的基礎知識最具有生命力,只有夯實基礎,我們才可能用有限的定義、定理、公式去應對無限變化的能力測試。其次,要重視糾錯、不犯重復性錯誤。復習、檢查的關鍵就是要糾錯,我們要抓住錯誤、理清錯誤,確保不犯同類錯誤。再次,要重視規范、養成規范答題的習慣。“習慣決定性格,性格決定命運。”平時練習就要養成步驟清晰、要點全面、書寫美觀的答題習慣,考場上才能有效答題。