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1.1資料來源
主要資料來源于廣東省醫學學術交流中心查新咨詢部科技查新項目管理信息系統,次要資料為紙質存檔文件,包括2007~2012年的中醫藥類查新咨詢委托單、查新課題申請書、查新報告書。
1.2方法
將2007~2012年中醫藥類查新項目的各項數據輸入MicrosoftExcel,并對不同類別進行統計分析。主要是針對查新系統查新數量、查新范圍及查新性質等進行統計分析。
2結果與分析
2.12007~2012年查新項目數量分析
無論是中醫藥類查新還是查新中心總查新量均逐年增加,但中醫藥總體構成比例相對比較穩定,在1057%左右浮動。
2.2同期論文產出情況
根據實際情況分析,來查新中心進行查新的項目,多來自于衛生廳、科技廳、中藥局以及地市級局級單位課題,僅少部分為院級課題,而其中中醫藥部分的查新多源于中藥局課題。因此,上述相關單位的決策在一定程度上影響著查新量。而職稱評審、成果獎勵則是促進因素。
2.3學科分類統計分析
本查新中心采用的學科分類標準是1992版國家標準(中華人民共和國國家標準GB/T13745-92),并對該標準進行了簡化,基于實際操作對中醫學與中藥學的分類概括地分為三類,即中醫學、中西醫結合醫學和中藥學,而國家標準中大類還包括了民族醫學及其他兩類。但由于各查新技術人員觀點不同,中醫和中藥的分類界限并不是十分明確,如很有可能將驗方、自擬方等納入中藥類。從表3大致來看,中西醫結合醫學所占比例最大,這符合當前醫學發展模式,它包括了中醫聯合西醫的治療研究和中醫應用的機制研究,體現了綜合療法的價值,肯定了醫學學者“知其然亦知其所以然”的科學觀;同時數據顯示,近幾年中西醫結合醫學的查新量有逐年遞增趨勢,間接地反映了該學科良好的發展前景。中醫類查新項目隨著中醫藥大類查新數量的遞增而有所增加,也間接地說明,在發展中醫藥強省的廣東地區,中醫藥的發展的確取得了成績,肯定了廣東建設中醫藥強省戰略。相對于其他兩類,中藥類查新比較穩定,而2012年數量更是有所下降,是否提示我省中藥研發發面是否有所欠缺值得進一步分析。
2.4查新范圍分析
查新范圍包括國內外和國內查新兩類。表4顯示,近幾年國內外查新項目數量逐年下降,平均比例為4298%,這與甘肅省醫學情報研究所等查新單位公布的數據接近(442%)[4],個人認為,引起該變化趨勢的原因可能包括:①業務發展相關問題,近幾年查新量遞增,任務加重,減少了國內外查新業務;②查新委托人(項目負責人)技術水平、知識水平;③醫護人員獲得文獻的能力增強,畢竟查新不等同于文獻服務。相比之下,中醫藥國內外查新數量更少(434%),但并不是逐年下降趨勢,這可能與中西醫結合醫學的發展有著關聯。
2.5查新性質及用途分析
查新中心為方便管理,將查新性質分為科研立項、成果鑒定和引文分析,并沒有進一步劃分為專利申請、申報獎勵等。引文分析常伴隨成果鑒定,基于科研立項和成果鑒定的查新統計見表5。醫學大類中立項均比例為8457%,遠低于中醫藥類科研立項查新(9023%),提示中醫藥科研項目的成果產出有待重視。
3思考與建議
從上述統計及結果分析來看,我省中醫藥的發展取得了一定成績,并呈可持續穩定發展趨勢。但相對全國水平而言,仍需進一步加強。我們在查新工作中發現不少科研選題來自他人已發表文獻,事實上用別人的框框來設計自己的課題,是很少能有創意的,并存在一定量的重復研究,表現尤為突出就是臨床應用研究。部分課題的創新點只停留在中藥組方的配伍,或者觀察指標的疊加上,其余的技術路線和研究方法均與別人雷同,挖掘不出其它更有意義的創新點。但值得一提的是,某些自擬方、經方驗方已得到同行認可,使之形成了產業化的中藥制劑。中醫藥在我國經歷了漫長的發展歷程,其進一步發展離不開科研工作者、科研管理者等多方面的協作。
3.1查新單位
中醫藥科技查新對減少中醫藥衛生科技項目低水平重復和科技成果評審具有重要意義,同時可以幫助科研工作者了解國內外有關課題的最新資料,及時修正課題的不足之處。從查新范圍來看,查新單位應加強查新項目的國內外查新,同時注重查新技術人員的人才培養,以滿足查新業務需求。查新單位除了查新咨詢業務外,為科研工作者提供文獻服務又是另外一大業務,而我省也正在籌建醫學數字圖書館來滿足這種需求。
3.2科研管理單位
統計結果表明成果查新課題遠遠低于立項查新課題的比例(9∶1),這可能與委托項目的科研周期和每年科研管理部門制定的科研政策有關。由于除申報獎項的課題要求鑒定查新外,其它課題完成后一般只需提供結題報告,建議有關部門可加強立項課題全程的科學管理,對課題中標單位早出、多出成果一定能起促進作用。我省中醫藥最近幾年論文產出(2172%)稍低于全國總水平(2243%),也提示了研管理部門督促管理的重要性。醫學科研管理部門應加強中醫藥學科技項。
3.3科研工作者
每個科研工作者的查新目的不一,獲得信息的能力也不同。建議科研工作者有良好的查新動機,認真對待申報課題;在選題前應進行文獻檢索,了解本學科的學術動態,將科學信息與研究結合起來,掌握與自己所研究課題相關的信息,避免無效的重復勞動,提高研究效率[5]。對于基層醫務人員,文獻檢索知識相對貧乏,搜索引擎和相關數據庫是其最佳選擇。在研究發面,應注重創新,比如藥物研發。創新則涉及自主知識產權,在我國加入WTO初期,不少中醫中藥類產權被他國搶注,值得深思。
3.4不足之處
中藥化學是中藥類本科專業的主干課程之一,該課程的學習目的是使學生掌握中藥化學成分的結構特征、提取分離、檢識和結構測定的基本理論和基本技能。就課程性質而言,中藥化學具有很強的實踐性、應用性,因此實驗教學效果直接關系到課程總體教學質量的高低和課程教學目標的實現。近年來,廣州中醫藥大學中藥學院以教育部高等學校本科教學質量與教學改革工程為契機,大力推進了實驗、實踐教學改革,并收到了顯著成效。在學院推進實驗實踐教學改革,著力提高學生實踐創新能力的背景下,筆者結合從事中藥化學實驗教學的實踐經驗,就深化中藥化學實驗教學改革,談談自己的心得和體會,以期共同提高教學質量。
1實驗教學現狀分析
實驗課程在中藥化學教學內容中占有重要比重,國內中醫藥院校中藥化學實驗課和理論課教學時數比多在1∶1至0.8∶1[1]。廣州中醫藥大學中藥學院所設中藥學、中藥資源與開發、制藥工程(中藥)三個中藥類本科專業均開設了中藥化學課程,課程總學時為126學時,其中實驗課54學時。實驗內容涉及生物堿、黃酮、蒽醌類成分的提取、分離、鑒定以及中藥化學的預試驗。中藥化學課程教學安排在第三學年,理論和實驗教學同時進行,教學內容在一學期內完成。實驗教學由中藥化學教研室組織實施,實驗器材準備和教學實驗室管理則由中藥學院實驗教學中心統一管理。教學過程中,每個教學實驗室由一位老師負責,共容納32名學生,2人一組。
近年來,我院中藥化學實驗教學在實驗體系設計、實驗內容、教學方法等方面進行了改革,教學質量顯著提升,但也發現存在一些問題,如實驗教學連貫性不足,實驗考核手段單一,實驗內容缺乏更新機制,對學生創新能力的培養有待加強等[2-3]。
2實驗教學改革的實踐和思考
2.1基于能力和素質培養構建多層次的實驗體系
基于學生能力和素質培養,我們設計了“驗證性、綜合性、綜合設計性”三個層次的實驗教學體系。將涉及生物堿、黃酮、蒽醌類成分提取、分離和鑒定的三個實驗項目設計為驗證性實驗,通過此類實驗項目使學生掌握中藥化學實驗的一些常用實驗技能。如溶劑提取法、結晶法、鹽析法、pH梯度萃取法、柱色譜法等提取分離方法,薄層色譜法、化學顯色反應等檢識方法。將中藥化學成分預試驗實驗項目定位為綜合性實驗,通過對未知中藥中化學成分進行預試驗來培養、鍛煉學生綜合運用前一階段所掌握的理論知識和實驗技能來解決實際問題的能力。驗證性和綜合性實驗均給學生提供參考實驗講義,對于驗證性實驗,在授課時對實驗原理和操作進行詳盡講解,必要時進行操作演示。對于綜合性實驗,在實驗項目設計時使實驗結果具有開放性,授課時壓縮講解時間,教師以引導為主,僅對關鍵環節進行簡要點撥。此外中藥化學還開設了一門35學時單獨設課的綜合設計性實驗,安排在第四學年第一學期進行。
已先后開設了“穿心蓮內酯提取分離和鑒定”和“丹參藥材中丹參酮IIA的分離與鑒定”兩個實驗項目。設計性實驗的教學環節設計如下:教師實驗項目學生選題教師布置實驗任務學生文獻調研撰寫實驗設計方案方案陳述教師點評實驗方案學生實驗撰寫研究報告收集反饋意見項目優化和改進。本層次的實驗以能力和科研素養培養為主,旨在綜合培養學生研究文獻的系統查閱、整理和總結能力、實驗設計與統計、選擇儀器設備以及撰寫實驗性論文等各方面的能力,訓練學生對事物進行客觀的觀察、比較、分析、綜合和解決實際問題的能力。
2.2優化實驗教學安排提高實驗教學效率
我院中藥化學實驗現設有四個實驗項目,每個實驗項目14個學時左右,而每周只有一次4學時左右的實驗課,因此每個實驗項目要延續多周才能完成。致使實驗連貫性較差,兩次內容相關的實驗課程間隔時間偏長,不利于學生知識學習和實驗技能掌握。因此從教學效果出發,最好能將相關實驗內容安排在一天中完成,但是由于中藥化學實驗的自身特點,部分實驗需要耗費較長的時間,難以在一天或一次實驗中完成。如從“槐花米中蘆丁的提取、分離和鑒定”這一實驗項目,水煎煮提取液必須長時間靜置才能得析出晶形較好的蘆丁粗品。要解決上述矛盾,在教學過程中就需要對教學內容進行優化,把密切相關的實驗環節盡量安排在一次實驗課中完成。例如“虎杖中蒽醌類成分的提取分離和鑒定”這一實驗項目,通過對提取時間進行優化,將原來分兩次實驗進行的乙醇提取和蒸餾濃縮兩步壓縮到一次實驗完成。又如在成分檢識時需用到硅膠薄層板,以前是單獨安排一次課來鋪制薄層板,通過內容優化將其和小檗堿的重結晶實驗合并為一次實驗課完成。此外,由于理論課和實驗課是同時進行的,理論課和實驗課的內容難以完全同步,有些實驗內容開始時理論課可能還未授課,因此必須強化實驗預習這一環節,要求學生在課前通過預習明了實驗目的和意義,熟悉實驗過程,從而避免因實驗內容生疏而降低實驗效率。通過上述實驗內容和設計方面的優化,顯著提高了教學效率。
2.3實驗考核方式多元化強化能力考核
現行中藥化學實驗教學考核方式較單一,對實驗過程考核開展較少,主要從實驗出勤率、實驗報告來評定學生的實驗成績,對學生實驗能力的區分度不高。中藥化學實驗考核可根據實驗課程體系的特點選擇靈活多樣的考核方式。驗證性實驗項目考核方法可采用“實驗報告+操作規范+現場提問、筆試”等方式相結合;而設計性、綜合性實驗考核以能力考核為導向,以綜合設計能力和科研素質考核為主,注重過程性評價。中藥化學綜合設計性實驗由教師指導小組負責對學生的考核,通過對實驗設計方案、方案陳述效果、實驗操作、實驗原始記錄、實驗報告及答辯情況等多環節的綜合評判來確定學生的實驗成績。該考核方式由于注重對實驗過程和綜合能力的評價,極大地激發了學生的研究興趣和創造熱情,受到了學生普遍歡迎。此外,我們還初步建立了考核效果的評價及反饋體系,在綜合設計性實驗設計了學生評教、師生總結的環節,在下一次實驗中根據教學效果反饋及時對教學進行調整。
2.4改進教學方法強化科研思維訓練
通過基礎化學實驗課程的學習,學生的化學實驗技能已經有了很大的提高,因此在專業課程教學中要逐步強化對學生分析問題和解決問題的訓練,在實驗教學手段上,可以采用啟發式教學。在中藥化學實驗教學過程中,學生已經具備了相應的知識和技能儲備。例如實驗中的薄層分析、重結晶操作,學生在基礎化學已經進行了相關操作,在實驗教學涉及到相關內容時,可以設計相關的提問,如“重結晶操作的關鍵是什么?”“怎樣才能展出一塊效果好的薄層板?”然后教師對學生的回答進行點評,引導他們分析問題,直至獲取問題的答案。實驗報告是學生實驗課堂學習的延續,它不僅可以反映學生對實驗原理、操作的掌握程度,也可以作為鍛煉學生科研思維的一種重要手段。在教學中,我們對實驗報告撰寫模式進行了改進,在驗證性、綜合性實驗項目中引入了討論式實驗報告,強化對實驗結果和討論部分的要求,并通過在實驗報告成績評定時加大分析討論部分的比重來引導學生的重視。要求學生在實驗報告撰寫時,用自己的語言對實驗過程進行描述,結合實驗原理對實驗結果進行分析,對實驗中遇到的問題展開討論。在綜合設計性實驗的教學中引入了論文式實驗報告,在報告中加入中英文摘要、討論、參考文獻等內容。同時要求學生提交原始記錄,從而鍛煉了學生對實驗中相關問題的分析能力,培養了學生嚴謹求實的科研理念。
2.5適應學科發展更新實驗內容
現階段我國中醫藥院校中藥化學實驗普遍存在實驗項目和實驗技術更新緩慢的不足,而中藥化學相關的實驗方法和技術卻更新、發展迅速,因此有必要不斷引入先進的實驗方法和技術手段。例如在蘆丁酸水解產物中糖的鑒別實驗中,以前曾采用紙色譜法,而現在紙色譜法已很少使用,因此在實驗教學中取消了這部分內容。超聲提取法目前已成為一種常規提取法,而原有實驗教學內容卻未涉及,為此在實驗項目中增設了相關實驗內容。波譜法如今是中藥化學成分結構鑒定的常規手段,但是在實驗教學中卻幾乎沒有涉及,在實驗條件允許的情況下,波譜法也應納入教學內容。對此,我們在綜合設計性實驗教學中,結合本院的教學條件設計了紅外波譜鑒定的環節,讓學生自行對純化產物進行紅外光譜的測定。更新后的實驗內容由于更加貼近工作實際,因而有效激發了學生的學習興趣。
2.6充分利用多媒體技術和網絡資源
拓展課外空間多媒體充分運用圖像、視頻、聲音、文字等手段,使呈現的信息生動直觀,有助于激發學生學習興趣,提高實驗教學的質量和效果。隨著教學條件的改善,多媒體輔助教學日益普遍,教師可根據教學內容的需要,把僅用語言講述效果較差的實驗內容制成多媒體課件,從而提高知識傳播效率。由于教學時數的限制,有些實驗內容學生無法進行實踐,對于這部分內容可以充分利用多媒體技術予以補充。如今網絡已成為學生獲取知識的重要媒介,很多高校已經構建了課程的網絡學習平臺,如精品課程網站。中藥化學實驗教學可以充分利用這些平臺,將制作的數字化實驗教學資源納入網站內容,供學生在課外學習。我院中藥化學實驗現行實驗項目主要涉及了生物堿、黃酮和蒽醌類成分,其它成分的實驗項目則沒有開展,對此教師可以把其它類型成分的相關實驗拍攝成圖片或視頻,上傳到網絡平臺,供學生進行擴展學習。
中圖分類號:R2-04 文獻標識碼:A 文章編號:1005-5304(2013)09-0096-02
中藥專業普通??平逃耘囵B高素質技能型中藥人才為目標,野外實踐教學在實現這一目標中具有校內課堂教學和實驗教學不可替代的作用。為進一步提高野外實踐教學的質量,適應社會經濟發展對中藥人才的需求,本校積極對傳統的單一野外中草藥識別采集模式進行改革,代之以綜合藥用植物標本采集、中藥基源分類、形態鑒定、中草藥資源保護開發利用等項目的新型實踐教學活動,在連續5年的實踐教學中收到了很好效果,得到了同行和用人單位的好評,畢業生就業率穩步提升。現就該專業野外綜合實踐教學改革總結如下。
1 因地制宜,選擇優質實習點
尋找合適的野外實習點,是提高實踐教學質量的核心。本校地處滇西,背靠聞名世界的動植物科學考察基地――高黎貢山。高黎貢山是南北走向、綿延600多公里的橫斷山脈。由于其跨越5個緯度,海拔高差3000多米,平均溫差高達20多度的特點,形成了“一山分四季,十里不同天”的立體多樣氣候環境。因而成為我國生物多樣性最豐富的地區,有高等植物4897種,
動物2389種,特有植物434種。境內目前已查明的中草藥品種有1200多種,已知有較高藥用價值的有430種,為全國少有的中草藥資源富集區,是中國國家級自然保護區、世界生物圈保護區,有著“世界物種基因庫”、“世界自然博物館”的美譽,是所有動植物學家向往的野外“研究室”。因此,本校充分利用這一得天獨厚的野外實習條件,將高黎貢山國家級白花嶺保護站作為中藥專業野外實習的總基地,以這個面為中心,沿途增加中藥材種植發展有限公司,保山機場齒瓣石斛、鐵皮石斛種植基地,云南省農業科學院熱帶作物研究所藥用植物引種園等實習點,這樣點、線、面結合形成了一個優質的綜合實踐教學場所。
本校從2008年首屆中藥專業班開始,每年到高黎貢山進行野外實踐教學。并與保護區一道共同建設,經過多年的努力,于2011年高黎貢山保護區實習基地被云南省教育廳評定為省級校外示范實習基地,從而確保了本校中藥專業野外實習的順利進行。
2 因時制宜,選擇恰當的實習時間
如何選擇適宜的實習季節和學期,直接影響到中藥野外綜合實踐教學的效果。高黎貢山的雨季一般為每年6-10月。為提高實習效果,采集到絕大多數帶花完全標本,我們通過分析比較,將實習時間由原來的每年7月份改為5月份。因5月雨量較少,為多數藥用植物花期,是藥用植物鑒別的最佳時期,這樣既避開了雨季的不安全和不便,也利于藥用植物的鑒別。
為了野外綜合實踐教學的順利完成,我們將之前第1學年第2學期進行的計劃調整為第2學年第4學期,因此時學生已完成中藥學、藥用植物學、中藥鑒定技術、中藥資源學、藥用植物栽培技術等相關課程學習,從而使單一的藥用植物學野外實踐教學變成了以上課程的綜合野外實習,豐富了實習內容,提高了實習的效率。
3 因人制宜,做好學生的實習教學
以學生為中心,以達成學生有效學習為目的,我們對中藥專業野外實習的組織和實施做了如下探索。
3.1 開展實習前動員和培訓
實習前,本校實習工作領導小組結合下發給學生的《高黎貢山野外綜合實踐教學指導手冊》,對實習學生進行充分動員,強調野外實習目的、意義、日程安排、考試等內容,并特別強調實習中的注意事項、紀律要求。與此同時,專業教師則對實綱、實習內容全面講解。布置學生閱讀中草藥圖譜、云南天然藥物圖鑒等相關書籍。分組帶領學生到校內百草園進行藥用植物采集、標本制作專業培訓,并進行藥用植物強化識別訓練,以掌握各類中草藥的鑒別要點。同時指導學生準備野外綜合實踐教學器材,包括相機、GPS、枝剪、小鋤頭、采集袋、記錄簽、便攜式烘箱、標本夾、吸水紙(報紙)、臺紙、定名簽、針、線、膠水等。
3.2 改革實踐教學內容
擴充實踐教學內容,改革過去僅限于100種左右藥用植物識別的簡單方式,融合中藥鑒定學、中藥資源學、藥用植物栽培技術等課程的實踐教學內容,形成綜合實踐教學模式。完成三方面的綜合教學實踐任務:①藥用植物學和中藥鑒定技術。藥用植物標本的采集、觀察、比較鑒定;采集具有典型特征的藥用植物,從植物分類學特征上觀察藥用植物的根、莖、葉、花、果實等器官,并重點觀察藥用部位器官形態特征,通過對不同種類藥用植物的觀察,深化植物分類知識;為保證各小組藥用植物鑒別實習效果,采取現場講解和返回后集中所有同學采集的藥用植物,利用檢索表、植物志、藥用植物圖鑒進行統一鑒定確定品種,教師詳細講解,學生輪流查看的方式。統一鑒定后,學生自行選擇所需藥用植物標本掛牌后壓制,進而放入50 ℃烘箱烘烤,次日整理和更換吸水紙,烘干后上臺紙,填寫定名簽和記錄簽,最后過塑保存。此項目要求掌握150種左右常見藥用植物科屬,熟悉其形態特征、藥用部位及功效。②中藥資源學。觀察不同海拔高度、不同生態環境中藥用植物種群類型、結構、分布、建群種;運用樣方調查的方法,設置選擇樣地、樣方,通過規范記錄樣方中的各種植物種類和數量,推算出區域內重點藥用植物蘊藏量、經濟量、年允收量,提出重點藥用植物資源保護開發利用的意見和建議,并撰寫重點藥用植物調查報告。③掌握重樓、齒瓣石斛等藥用植物生物學特性,生長發育所需的環境條件,并在此基礎上掌握選地、整地、種苗繁育技術、田間管理、病蟲害防治、采收初加工等栽培技術措施,并撰寫某種藥用植物栽培管理技術。
3.3 改革考核,綜合評價
傳統的中藥野外實踐教學考核只要求鑒別中草藥的種類。達不到全面綜合考查學生實踐效果的目的。為此,我們增加了考核的內容和步驟。考核內容除中藥學、藥用植物學相關知識及技能點外,還涵蓋了中藥鑒定學、中藥資源學、藥用植物栽培技術3門課程的相關知識及技能點。
考核的步驟與方法:①現場考試,從150種藥用植物中,選出50種代表藥用植物并排序,學生在答題卡上填寫相應序號藥用植物的植物名、科屬、入藥部位、功效,滿分100分,占該課程實踐技能的20%;②標本評展,實習結束后,每人上交壓制的2份標本,專業老師對學生壓制標本進行評分,占中藥鑒定課程的10%,對學生上交制作的標本評展,評出“認藥之星”,給予一定物質獎勵,激發學生的學習積極性。③撰寫中藥專業高黎貢山重點藥用植物調查報告,占中藥資源學實踐成績的20%。④撰寫某種藥用植物栽培管理技術論文,占該門實踐課程成績的10%。
4 拓展內涵,提升效果
4.1 編寫高黎貢山常用中草藥圖譜
針對學生缺乏與實習相適應圖譜的問題,我們選取了高黎貢山區域常用中草藥300余種。編寫成《高黎貢山常用中草藥圖譜》。該圖譜充分體現突出藥用植物鑒別要點、區域用藥特色,具有實用、簡便易攜帶的特點。
4.2 不斷積累臘葉標本
將學生制作的臘葉標本進行過塑、封存,教師將部分標本作為教學素材,增進了學生學習興趣,同時將部分標本充實到本校高黎貢山民族醫藥館,增強了學生的主人翁意識及成就感。
4.3 校內百草園中引種、馴化藥用植物
實習結束時,引種馴化部分藥用植物,目前我們已成功引種栽培滇重樓、云黃連、珠子參、齒瓣石斛、鐵皮石斛等名貴中草藥,現正在通過馴化,探索大規模推廣種植經驗,這不僅豐富了百草園藥用植物種類,便于學生日常學習,也為教師科研搭建了良好的基礎性平臺。
4.4 發揮高黎貢山實習基地對外交流的功能
高黎貢山保護區實習基地除承擔本校中藥專業野外實習教學外,還吸引了其他院校的學生前來交流學習。2012年8月,香港浸會大學中醫藥學院中藥專業8名師生到本校進行短期學習交流,通過實訓老師在高黎貢山實習基地的帶教,使學生充分掌握了藥用植物科屬鑒定、標本采集制作、藥材種植、采收加工等中藥專業知識,拓寬了該校中藥專業學生視野。這對擴大本校中醫藥教育對外交流與合作,起到積極作用。
【摘要】 目的 研究還陽參crepis turczaniowii c.a.mey.全草的化學成分。方法 采用硅膠、大孔吸附樹脂及聚酰胺層析柱進行分離和純化,通過理化、質譜及核磁共振等現代波譜技術鑒定化合物結構。結果 從還陽參石油醚部分分離得到2個化合物,分別鑒定為偽蒲公英甾醇乙酸酯(ⅰ)、β-谷甾醇(ⅱ);從其正丁醇部分分離到1個化合物,鑒定為連翹苷(ⅲ)。結論 化合物ⅰ、ⅱ、ⅲ均為首次從該植物中分離得到,ⅲ為首次從還陽參屬植物中分離得到。
【關鍵詞】 菊科;還陽參;化學成分
abstract:objective to study the chemical constituents in crepis turczaniowii c. a. mey. method the constituents were isolated and purified by column silica, polystyrene resin ra and polyamide columbine chromatography, and the structures were identified by physicochemical data, ms and nmr. result two compounds were obtained in the petroleum ether fractions as ω-taraxasteryl acetate (ⅰ) and β-sitosterol (ⅱ), and one compound was obtained in the n-buoh fractions as phillyrin (ⅲ). conclusion all above compounds are obtained from the plants of crepis turczaniowii c. a. mey. for the first time. ⅲ is isolated from crepis l. for the first time.
key words:compsitea;crepis turczaniowii c. a. mey.;chemical constituent
還陽參crepis turczaniowii c.a.mey.為菊科還陽參屬植物,別名屠還陽參、驢打滾兒草,多年生草本植物,生長于山坡、路旁,主要分布在山西、內蒙古[1]一帶,資源豐富,為民間習用草藥。其味苦,性微寒,具有止咳平喘、清熱降火、益氣之功效,用于治療支氣管炎、肺結核、喘息性慢性支氣管炎等疾病。有關其化學成分及生物活性,未見任何文獻報道。藥效學實驗研究表明,還陽參全草的石油醚提取物能減少小鼠咳嗽次數,并能延長小鼠的咳嗽潛伏期,有明顯的止咳作用;正丁醇提取物能保護組胺和乙酰膽堿對豚鼠引起的哮喘,具有平喘作用[2]。為了探尋其止咳平喘作用的物質基礎,本實驗對還陽參石油醚提取物和正丁醇提取物進行了化學成分的研究,結果從石油醚部分分離得到兩個化合物,分別為偽蒲公英甾醇乙酸酯(ω-taraxasteryl acetate,ⅰ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,ⅱ);從正丁醇部分分離到一個化合物,鑒定為連翹苷(phillyrin ,ⅲ),化合物ⅰ、ⅱ、ⅲ都是首次從植物還陽參中分離。
1 實驗材料
yanaco顯微熔點測定儀(未校正);瑞士bruker ifs-55型紅外分光光度計;瑞士bruker-arx-300型核磁共振儀;美國菲尼根lcq-ms質譜儀。聚酰胺(柱層析用,80~100目,浙江臺州市路橋四甲生化塑料廠)、大孔吸附樹脂(d-101型,16~60目,天津農藥股份有限公司樹脂分公司)、硅膠(柱層析用,160~200目,青島海洋化工有限公司)。其他試劑均為分析純。還陽參藥材采集于山西省山陰縣(采集時間8-9月份),
經山西省藥品檢驗所高天愛主任藥師鑒定為菊科植物還陽參crepis turczaniowii c. a. mey.的全草。
2 提取分離
還陽參粗粉4 kg,以70%的乙醇加熱回流提取3次,合并提取液,減壓濃縮得到浸膏。用適量水分散,依次用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取,減壓回收溶劑并濃縮,分別得到石油醚部分(99 g)、醋酸乙酯部分(48.6 g)、正丁醇部分(114.5 g)。取石油醚部分20 g,加乙醚適量使溶解,用硅膠拌勻,乙醚自然揮干,上硅膠柱,以石油醚-醋酸乙酯梯度洗脫,得3個流份,再經反復硅膠柱層析分別得化合物ⅰ(30 mg)、ⅱ(20 mg)。取正丁醇部分10 g,加水攪拌,使混懸,靜置2 h,取上清液,加入處理好的d-101型大孔吸附樹脂柱,依次以水、30%、60%、95%的乙醇洗脫,紫外檢測器跟蹤檢測,收集洗脫液,減壓回收溶劑,得到4個不同濃度乙醇洗脫流分,將其中30%乙醇洗脫流份經聚酰胺柱層析和反復硅膠柱層析,得到化合物ⅲ(40 mg)。
3 結構鑒定
化合物ⅰ為無色針狀結晶(醋酸乙酯),mp 238~240℃, libermann-burchard反應陽性,tlc噴10% h2so4,加熱后顯紫紅色。易溶于氯仿、乙醚,微溶于甲醇、丙酮。irvkbrmax cm-1:1 731、1 247、2 943、2 850、1 640 cm-1。1h-nmr(cdcl3)δ:4.46 (1h,t,c21-h),2.03(3h,s,ch3-co),1.05,0.995,0.956,0.922, 0.895,0.826,0.748(21 h,m,7×ch3)。ei-ms(m/z):468(m+)、453(m-ch3)、408(m-ch3co-h2o)、393、249、204、189。與偽蒲公英甾醇乙酸酯對照品薄層色譜rf值[3]及顯色行為一致。綜合分析以上數據,并結合文獻[4-5]對照,確證化合物ⅰ為偽蒲公英甾醇乙酸酯。
化合物ⅱ為無色針狀結晶(石油醚-氯仿),易溶于氯仿、乙醚,mp137~138 ℃,libermann-burchard 反應陽性。在數種不同展開劑條件下進行薄層層析,其rf值與β-谷甾醇對照品一致,并且與對照品混合后展開,只顯示一個斑點。綜合上述分析,故鑒定該化合物為β-谷甾醇。
化合物ⅲ為白色粉末,mp 148~150 ℃,molish反應陽性,不溶于氯仿,微溶于甲醇,易溶于熱甲醇。該化合物經酸水解后,pc鑒定有葡萄糖。irvkbrmaxcm-1:3412,2923,2800,1744, 1614,1516,1448,1410,1261,1161,1075,1036,914,817。fab- ms m/z(%):533[m-1],372[m-glc]+。1h-nmr(c5d5n)δ:8.7 (1h,s,ar–h),7.6-6.9(6h,m,arom h),3.75-3.68(9h,s,2o ch3), 4.66(1h,d,j=6.9hz,glc-1h)。13c-nmr(c5d5n)δ:132.2 (c-1), 136.3(c-1'),110.5(c-2),111.1(c-2'),148.0(c-3),149.0(c-3'),147.5(c-4,c-4'),112.4(c-5),116.3(c-5'),118.4(c-6), 119.1(c-6'),82.3(c-7),87.9(c-7'),50.5(c-8),55.2(c-8', och3),71.3(c-9,c-9'),55.9(2o ch3),glc:102.3(c-1),74.9 (c-2),78.6(c-3),70.0(c-4),78.9(c-5),62.0(c-6)?;衔铫5?3c-nmr和1h-nmr波譜數據與文獻[6]的連翹苷的數據比較,兩者基本一致。因此鑒定化合物ⅲ為連翹苷。
【參考文獻】
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[6] 石 鉞.銀翹散抗流感病毒有效部位群化學成分的分離與鑒定[j].中國中藥雜志,2001,28(1):43-46.
【摘要】 目的 研究還陽參crepis turczaniowii c.a.mey.全草的化學成分。方法 采用硅膠、大孔吸附樹脂及聚酰胺層析柱進行分離和純化,通過理化、質譜及核磁共振等現代波譜技術鑒定化合物結構。結果 從還陽參石油醚部分分離得到2個化合物,分別鑒定為偽蒲公英甾醇乙酸酯(ⅰ)、β-谷甾醇(ⅱ);從其正丁醇部分分離到1個化合物,鑒定為連翹苷(ⅲ)。結論 化合物ⅰ、ⅱ、ⅲ均為首次從該植物中分離得到,ⅲ為首次從還陽參屬植物中分離得到。
【關鍵詞】 菊科;還陽參;化學成分
study on chemical constituents in crepis turczanilwii
ni yan, lu fang-jin, hao xu-liang, et al
shanxi academy of tcm, taiyuan 030012, china
abstract:objective to study the chemical constituents in crepis turczaniowii c. a. mey. method the constituents were isolated and purified by column silica, polystyrene resin ra and polyamide columbine chromatography, and the structures were identified by physicochemical data, ms and nmr. result two compounds were obtained in the petroleum ether fractions as ω-taraxasteryl acetate (ⅰ) and β-sitosterol (ⅱ), and one compound was obtained in the n-buoh fractions as phillyrin (ⅲ). conclusion all above compounds are obtained from the plants of crepis turczaniowii c. a. mey. for the first time. ⅲ is isolated from crepis l. for the first time.
key words:compsitea;crepis turczaniowii c. a. mey.;chemical constituent
還陽參crepis turczaniowii c.a.mey.為菊科還陽參屬植物,別名屠還陽參、驢打滾兒草,多年生草本植物,生長于山坡、路旁,主要分布在山西、內蒙古[1]一帶,資源豐富,為民間習用草藥。其味苦,性微寒,具有止咳平喘、清熱降火、益氣之功效,用于治療支氣管炎、肺結核、喘息性慢性支氣管炎等疾病。有關其化學成分及生物活性,未見任何文獻報道。藥效學實驗研究表明,還陽參全草的石油醚提取物能減少小鼠咳嗽次數,并能延長小鼠的咳嗽潛伏期,有明顯的止咳作用;正丁醇提取物能保護組胺和乙酰膽堿對豚鼠引起的哮喘,具有平喘作用[2]。為了探尋其止咳平喘作用的物質基礎,本實驗對還陽參石油醚提取物和正丁醇提取物進行了化學成分的研究,結果從石油醚部分分離得到兩個化合物,分別為偽蒲公英甾醇乙酸酯(ω-taraxasteryl acetate,ⅰ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,ⅱ);從正丁醇部分分離到一個化合物,鑒定為連翹苷(phillyrin ,ⅲ),化合物ⅰ、ⅱ、ⅲ都是首次從植物還陽參中分離。
1 實驗材料
yanaco顯微熔點測定儀(未校正);瑞士bruker ifs-55型紅外分光光度計;瑞士bruker-arx-300型核磁共振儀;美國菲尼根lcq-ms質譜儀。聚酰胺(柱層析用,80~100目,浙江臺州市路橋四甲生化塑料廠)、大孔吸附樹脂(d-101型,16~60目,天津農藥股份有限公司樹脂分公司)、硅膠(柱層析用,160~200目,青島海洋化工有限公司)。其他試劑均為分析純。還陽參藥材采集于山西省山陰縣(采集時間8-9月份),
經山西省藥品檢驗所高天愛主任藥師鑒定為菊科植物還陽參crepis turczaniowii c. a. mey.的全草。
2 提取分離
還陽參粗粉4 kg,以70%的乙醇加熱回流提取3次,合并提取液,減壓濃縮得到浸膏。用適量水分散,依次用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取,減壓回收溶劑并濃縮,分別得到石油醚部分(99 g)、醋酸乙酯部分(48.6 g)、正丁醇部分(114.5 g)。取石油醚部分20 g,加乙醚適量使溶解,用硅膠拌勻,乙醚自然揮干,上硅膠柱,以石油醚-醋酸乙酯梯度洗脫,得3個流份,再經反復硅膠柱層析分別得化合物ⅰ(30 mg)、ⅱ(20 mg)。取正丁醇部分10 g,加水攪拌,使混懸,靜置2 h,取上清液,加入處理好的d-101型大孔吸附樹脂柱,依次以水、30%、60%、95%的乙醇洗脫,紫外檢測器跟蹤檢測,收集洗脫液,減壓回收溶劑,得到4個不同濃度乙醇洗脫流分,將其中30%乙醇洗脫流份經聚酰胺柱層析和反復硅膠柱層析,得到化合物ⅲ(40 mg)。
3 結構鑒定
化合物ⅰ為無色針狀結晶(醋酸乙酯),mp 238~240℃, libermann-burchard反應陽性,tlc噴10% h2so4,加熱后顯紫紅色。易溶于氯仿、乙醚,微溶于甲醇、丙酮。irvkbrmax cm-1:1 731、1 247、2 943、2 850、1 640 cm-1。1h-nmr(cdcl3)δ:4.46 (1h,t,c21-h),2.03(3h,s,ch3-co),1.05,0.995,0.956,0.922, 0.895,0.826,0.748(21 h,m,7×ch3)。ei-ms(m/z):468(m+)、453(m-ch3)、408(m-ch3co-h2o)、393、249、204、189。與偽蒲公英甾醇乙酸酯對照品薄層色譜rf值[3]及顯色行為一致。綜合分析以上數據,并結合文獻[4-5]對照,確證化合物ⅰ為偽蒲公英甾醇乙酸酯。
化合物ⅱ為無色針狀結晶(石油醚-氯仿),易溶于氯仿、乙醚,mp137~138 ℃,libermann-burchard 反應陽性。在數種不同展開劑條件下進行薄層層析,其rf值與β-谷甾醇對照品一致,并且與對照品混合后展開,只顯示一個斑點。綜合上述分析,故鑒定該化合物為β-谷甾醇。
化合物ⅲ為白色粉末,mp 148~150 ℃,molish反應陽性,不溶于氯仿,微溶于甲醇,易溶于熱甲醇。該化合物經酸水解后,pc鑒定有葡萄糖。irvkbrmaxcm-1:3412,2923,2800,1744, 1614,1516,1448,1410,1261,1161,1075,1036,914,817。fab- ms m/z(%):533[m-1],372[m-glc]+。1h-nmr(c5d5n)δ:8.7 (1h,s,ar–h),7.6-6.9(6h,m,arom h),3.75-3.68(9h,s,2o ch3), 4.66(1h,d,j=6.9hz,glc-1h)。13c-nmr(c5d5n)δ:132.2 (c-1), 136.3(c-1'),110.5(c-2),111.1(c-2'),148.0(c-3),149.0(c-3'),147.5(c-4,c-4'),112.4(c-5),116.3(c-5'),118.4(c-6), 119.1(c-6'),82.3(c-7),87.9(c-7'),50.5(c-8),55.2(c-8', och3),71.3(c-9,c-9'),55.9(2o ch3),glc:102.3(c-1),74.9 (c-2),78.6(c-3),70.0(c-4),78.9(c-5),62.0(c-6)。化合物ⅲ的13c-nmr和1h-nmr波譜數據與文獻[6]的連翹苷的數據比較,兩者基本一致。因此鑒定化合物ⅲ為連翹苷。
【參考文獻】
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系統中藥依循著名中藥學家凌一揆教授“系統中藥”思想,認為中藥學是祖國醫學的重要組成部分,是在中醫理論指導下研究中藥基本理論和中藥品種、產地、采集、泡制、性能、功效及臨床應用等知識的一門綜合學科,其涵蓋了中藥基本理論及臨床應用、中藥品種品質與鑒定、中藥藥理毒理、中藥物質基礎與質量標準、中藥泡制與制劑等內容的系統知識。根據該理念,實驗項目的設置緊緊圍繞中藥鑒定、中藥泡制、中藥制劑、中藥藥理、中藥化學等方面展開,并注重各學科專業技能之間的交叉融合,開設綜合性、設計性實驗,培養學生的系統的中藥知識。實踐創新圍繞我?!芭囵B基礎扎實、知識面寬、能力強、綜合素質高的中藥學創新人才,為地方經濟建設和社會發展服務”的中藥人才培養的目標,中心注重學生實踐能力和創新能力等方面的培養。根據該理念,采取開設綜合性、設計性實驗、實行導師制、推行畢業專題、設立本科學生科技基金等措施,以培養學生的動手能力、專 業技能、科技創新能力和科研思維等,加強創新能力和科研動手能力的培養,提升學生實踐創新能力?!搬t藥結合、系統中藥、實踐創新”的教育理念集中體現了中心對中藥本科教學和學習活動內在規律的認識,適應了新形勢對中藥人才培養的需要,是我校從事中藥創新人才培養的指導思想和行動指南。
構建了“一中心兩階段三層次”的實驗教學模式
中心在建設過程中針對現階段中藥學術、學科、產業、事業等發展的需要,積極進行了新形勢下中藥創新人才培養模式的探索,構建出能培養學生創新意識和創新能力、提高教學質量的“一中心兩階段三層次”實驗教學模式,(圖略)。一中心“一中心”是指從實質上要以培養學生的實踐創新能力為中心。通過逐漸壓縮驗證性、演示性的實驗內容,增加綜合性、設計性和創新性的實驗內容,培養學生的科研素質和創新意識,提高學生的獨立工作能力和創新能力。為了適應創新性人才培養,中心聯合了全國33家單位、121位專家共同編寫1套《國家級中藥學實驗教學示范中心•中藥學實踐教學創新系列教材》(共7本),構筑了相對獨立和完整的中藥實踐教材新體系,在兄弟院校中起到了很好的示范效應和應用效果[10-11]。兩階段“兩階段”是指從時間上將實踐教學分為基礎專業技能培訓和科研創新能力培養兩個階段。一、二年級為第一階段,以系統中藥學為主線,以獨立開展實驗課的方式,將化學、藥理、藥植與鑒定、泡制與制劑等基礎和專業知識與技能融會貫通,使學生系統掌握中藥學基礎知識與技能,培養創新思維。三、四年級為第二階段,引入導師制,以國家級重點學科中藥學為依托,以國家自然科學基金、“863”、“973”等縱向課題及校企合作項目等為 支 撐,進行科研 訓練,加 強 創 新 能 力 的培養。三層次“三層次”是指從內容上由課堂實驗教學、實習實訓和科研實踐3個層次構成。課堂實驗教學由基礎性實驗、專業性實驗、綜合設計性實驗3部分組成。其中基礎性實驗含無機化學實驗、有機化學實驗、分析化學實驗等內容[12];專業性實驗包含中藥鑒定實驗、中藥泡制與制劑實驗、中藥藥理實驗、中藥化學實驗等內容;綜合性設計性實驗為融中藥方藥分析、中藥品種品質與鑒定、中藥化學成分提取分離與質量評價、中藥泡制與制劑技術、中藥藥效與毒理等為一體的實驗。實習實訓由野外實習、生產實習、醫院實習3部分組成,目前共有實習基地29個。其中野外實習主要包括藥用植物高山實習、道地藥材產地實習、中藥鑒定標本館實習等組成;生產實習包括中藥泡制、中藥制劑生產工藝、生產技術等工廠實習;醫院實習包括醫院藥房實習、模擬醫院實習、ADR及GCP的參觀實習等。科研實踐由學生科技基金、參加教師科研、畢業專題實習三部分組成。學生科技基金由學生自主申請課題,撰寫開題報告,進行實驗研究;教師科研項目實行導師制,鼓勵學生從大二、大三就參與教師科研課題的研究;畢業專題實習實行1人1題,導師全程指導,中心中期檢查,學生必須撰寫畢業論文并通過畢業答辯。以此培養學生實踐創新能力[13]?!耙恢行膬呻A段三層次”的實驗教學體系充分體現了實驗教學注重課內與課外相結合、實驗教學與科學研究相結合、多元化培養與個性化培養相結合,收到了良好的效果。
搭建了“統一化、網絡式、綜合型”的實驗教學平臺
在目前實驗教學平臺的基礎上進一步優化組合,搭建統一化實驗平臺、網絡式信息平臺、綜合型技術平臺,滿足創新性人才培養的需求[14]。統一化實驗平臺通過整合人力資源、設備條件,加強了理論教學平臺與實驗教學平臺的互通,加強了實驗平臺、技術平臺、實習實訓平臺的互補,加強了科研實驗室與教學實驗室的互融。網絡式信息平臺利用網絡多媒體技術,一方面不斷改進網上選課系統,使學生真正做到網上預約實驗、網上模擬實驗、網上師生互動;另一方面加強網絡化管理平臺的建設,強化網絡監督、考核評估。綜合型技術平臺充分利用我校中藥學國家級重點學科建設成果,發揮科研技術對實驗教學的促進作用,加強各學科之間的交叉融合,注重理論教學與實驗教學相結合、課內實驗與課外實踐相結合、多元化與個性化培養相結合、大眾化培養與精英教育相結合,打造以培養學生的動手能力、專業技能、科技創新能力和科研思維的綜合型技術平臺。
積累了“理念優先、捆綁集成、創新為重”的建設經驗
理念優先理念是先導,理念要與時俱進。在中心的建設過程中,我校歷來重視對實驗教學理念的凝練,把實驗教學理念放在優先的位置,以適應不同時期社會和時代對人才培養的需要。從創辦之初的“早實踐、多實踐”到現在的“醫藥結合、系統中藥、實踐創新”的實驗教學理念無不都適應了社會和時展的需要,為中藥學創新人才培養作出了重要貢獻。捆綁集成中心在建設過程中采取捆綁集成的方式進行建設,具體來講包括兩種形式,一是將教改項目研究與中心建設緊密結合,通過這樣的方式將中心建設過程中的思路理清;二是將學科建設與中心建設緊密結合,通過這樣的方式使經費能捆綁投入,綜合集成進行建設,形成了高顯示度、規模效益明顯的教學實驗大平臺。創新為重中心在建設過程中始終以創新為重,把培養學生的創新能力作為中心建設的目標。為此我們對原有的實驗教學方面原有的人員、設備、實驗室等資源進行了整合,對實驗內容進行了調整,增大設計性、創新性、綜合性 的實驗比重,增大實驗室的開放力度,建設以創新為主的實驗室———圖書館式的實驗室等。通過這些舉措,把創新放在重要位置,提高學生的創新能力。
關鍵詞:植物化學;化學專業;教學
中圖分類號:G642.41 文獻標志碼:A 文章編號:1674-9324(2013)48-0195-02
植物化學是應用現代化學理論和方法研究植物中的化學成分的一門學科。其研究內容包括植物成分(主要是具有生理活性的次生代謝產物)的提取、分離純化、結構鑒定、理化性質以及主要結構類型化合物的生物合成途徑和生物轉化等。植物化學是植物學與有機化學相結合而形成的一門交叉學科,是天然有機化學或天然產物化學的重要組成部分,是在分子水平上揭示植物奧秘的學科,也是植物資源合理利用的基礎。植物成分不僅是天然藥物的重要組成部分,是發現新藥或藥物活性先導化合物的重要來源,而且還廣泛應用于農業、工業、日用化工、食品、染料和化妝品等行業。我國對植物資源的利用有著悠久的歷史和傳統,涉及社會生活的方方面面?;瘜W專業的學生畢業后許多會從事與植物成分有關的深造學習、技術、管理和服務工作。學生在本科學習階段進行植物化學基本知識和實驗操作技能的學習,對將來的深入學習和工作無疑具有重要的意義。鑒于這種情況,結合云南豐富的植物資源和地域特點,為了讓學生盡早了解社會的發展和需求,拓寬知識面,改善知識結構,更好地融入社會,投身經濟建設主戰場,圍繞國家“西部大開發”和云南建設“綠色經濟強省”的戰略目標,我們于1996年開始為化學專業高年級學生開設“植物化學”課?,F根據十多年來的教學工作,談談教學中的幾點體會。
一、課程定位與目標
根據《國家中長期教育改革和發展規劃綱要》,培養造就適應我國經濟社會發展需要的高質量多樣化人才成為新形勢下我國高等教育教學改革的重點。植物化學課程以“培養厚基礎、高素質、強能力的復合型人才”為人才培養的基本目標。由于我校的學生多數來自云南,結合云南的資源特點、社會、經濟發展的實際,課程定位于培養的學生具有寬廣的化學基礎知識,不僅可以勝任傳統的中學化學教學,而且能夠根據自身情況和當地社會經濟發展的需要,進行與植物成分相關的研究工作和產品開發,或者為進一步的深造提高打下堅實的基礎。植物化學的課程目標是讓學生認識植物化學的應用領域,了解植物化學研究的內容、目的、意義、發展現狀和趨勢;了解植物化學成分研究的程序及純化合物的結構鑒定方法;了解各類重要植物化學成分的生物活性及應用;掌握植物化學成分常用的提取、分離方法,理解提取分離的原理;掌握各類重要植物化學成分如:糖、苷、萜、甾體、生物堿、芳香族化合物(香豆素、木脂素、黃酮)等的化學結構特征、性質和提取分離的方法。為繼續學習以及畢業后從事與植物成分相關的工作打下理論和實踐基礎。通過植物化學實驗,鍛煉學生在植物化學領域的實驗操作技能,通過實驗加強理解理論知識,培養學生理論聯系實際和解決實際問題的能力。進一步要求通過植物化學課程的學習,讓學生感覺學到的知識就在自己的身邊。通過開放實驗、大學生課外科技活動、畢業論文設計等,鍛煉學生的創新思維、動手能力;培養學生從提出問題,到分析問題和解決問題的能力;強調合作學習,包括師生之間的合作、同學之間的合作,培養學生嚴謹求實的科學態度、團結互助的團隊合作精神;培養學生適應現代知識體系發展的綜合能力。
二、教學內容設置
與其他化學專業課相比,植物化學課在化學專業中開設較少,無專門的教材。國外有的院校為學生開設“天然產物化學”,課時不多,無專門的教材;國內藥學專業、中藥專業等有“天然藥物化學”、“中藥化學”等教材。植物化學只有農林院校主編的兩本教材,側重于農林專業。為了編寫適合化學專業使用的植物化學教材,我們于1998年編撰印刷“植物化學”講義,在教學中使用。2004年,我們組織云南高校植物化學研究領域的科技人員,又是奮斗在教學一線的教師一起編寫了《植物化學成分》一書,由化學工業出版社出版。該書內容既包括了植物化學成分的基本知識,又兼顧學科最新進展。尤其具有中國(包括云南)天然產物的特色,與社會的需求和發展緊密,便于學生把握植物化學的研究趨勢和發展脈搏。《植物化學》課程由四大知識模塊構成。第一部分,植物化學概論。包括植物化學的研究內容、意義、目的、研究程序、研究形勢和發展趨勢;植物化學成分提取、分離、結構鑒定的方法。第二部分,各類常見植物成分的結構特征、理化性質、提取分離、純化精制以及結構鑒定的基本方法。第三部分,自主學習。每名同學就自己家鄉特色的藥用植物1~2種,對其活性成分的提取、分離方法及在醫藥、保健品、染料、色素和化妝品等領域的應用通過查資料后,寫成小論文進行討論。第四部分,植物化學實驗。培養學生植物化學領域的實驗操作技能,通過實驗加強理解理論知識,培養學生理論聯系實際和解決實際問題的能力。部分同學通過進一步的開放實驗、大學生課外科技活動、畢業論文設計等,鍛煉創新思維和動手能力。理論課授課共54學時,植物化學實驗共36學時。
三、教學方法
采用課堂講授、課堂討論、實驗、課外互動及學生課外查閱資料、閱讀、歸納總結、報告、課外科技活動等方法進行教學。
1.課堂講授。課堂講授中注重經典內容和學科發展的有機結合;注重熱點植物化學成分和云南特色藥用植物的有機結合。采用多媒體授課,既有效地利用了課時,使學生在單位時間內獲得較大的知識量,又能將植物圖片、復雜的植物成分結構等一些比較抽象的內容形象化、具體化,生動地表現出來,加深學生的理解。將植物化學課件上網或打印出來提供給學生,使學生能夠課前預習,課堂上能夠跟得上教師的思路。通過課堂講授,使學生系統地獲得了各類植物化學成分的結構特征、主要理化性質、提取、分離方法、生物活性等知識。
2.課堂討論。通過課堂討論培養學生對植物化學基本理論和基本知識的歸納總結及綜合應用的能力。啟發學生從應用的角度綜合地去掌握植物化學知識。如生物堿的提取,根據所學生物堿的結構特征、理化性質,讓學生歸納其提取分離有哪些方法等。學生發言踴躍,對各種不同的提取方法提出自己的見解和質疑。
3.課外互動。課程教學中要求每個學生就自己熟悉的藥用植物1~2種,自己出題,在課外進行資料查閱、歸納總結、小論文寫作和幻燈片制作。這個過程,增加了學生與老師的互動和同學之間的交流討論。彌補了植物化學內容多、課時少、輔導答疑時間有限的缺陷,也有利于學生釋放自我,激發潛能,培養綜合能力。學生將自己的課后閱讀資料做成PPT進行匯報,一方面引導學生“走出書本”,擴大學生的知識面,鍛煉了其查閱文獻、分析和解決問題的能力;另一方面,提高了其專業交流的水平。
4.科研反哺教學。教學中,緊密結合云南特色藥用植物成分或課程組教師的科研工作進行案例探討,讓學生覺得所學知識聯系實際,有用,加深學生對所學知識的理解。如在結構鑒定、黃酮、二苯乙烯、環烯醚萜、二萜、三萜等內容的教學中,結合課程組教師的工作進行講解,深受同學歡迎。既讓學生對自己老師的工作有所了解,又收到了良好的教學效果。
為了培養學生的實際動手能力以及發現問題、分析問題和解決問題的能力,安排了6~10個植物化學實驗,培養學生對常見植物化學成分提取、分離、鑒定的實際操作能力。為進一步加強對學生創新能力、實踐能力、思維能力的培養,充分利用課程組教師科研課題較多、科研能力較強、科研方向與云南省地方經濟發展緊密結合的特點,鼓勵學生根據自己的興趣,參加教師的科研活動,或在教師的實驗室進行畢業論文實驗,或自主申請省、校課外科技活動資助進行探索學習,以激發學生的學習興趣,實現科研反哺教學。每年均有二十多名同學參與植物化學課程組老師的科研項目研究,在老師的指導下進行課外科技活動。
四、教學效果
植物化學課程由于貼近生活,與社會、經濟發展密切相關,深受學生喜愛。學生的學習興趣和主觀能動性大大增強,資料查閱、綜合分析、實驗操作、論文或報告寫作、科學思維等能力有很大的提高。自主申請學校的大學生課外科研基金,或參與老師的科研項目進行研究的熱情高漲。相當一部分學生考取植物化學方向的碩士研究生進一步深造,作為人生的進一步追求。一些同學通過自主學習或參加課外科技活動,發表了學術論文,一些同學的課外科技作品獲得了全國大學生“挑戰杯”課外學術科技作品競賽三等獎等獎勵。
參考文獻:
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【關鍵詞】云南娃兒藤;揮發性成分;氣相色譜-質譜法
【中圖分類號】R2841【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517(2017)08-0024-03
Abstract:To analyze the chemical constituents of volatile components from Tylophora yunnanensis Schltr. The air-dried stems and leaves of Tylophora yunnanensis Schltr were extracted with the petroleum ether and identified by GC-MS18 constituents were identified from the petroleum ether extraction of Tylophora yunnanensis Schltr,and the relative contents of the components were determined with area percentage method. The research provides a theoretical basis for the study of chemical constituents and pharmaceutical activities of Tylophora yunnanensis Schltr.
Keywords:Tylophora yunnanensis Schltr; Volatile components; GC-MS
云南娃兒藤(Tylophora yunnanensis Schltr)為蘿科娃兒藤屬植物,其根在彝藥中稱為小白薇,常用來治療尿路感染、腎炎、痢疾、氣虛無力等[1]。其主要生長于海拔2000m以下的山向陽曠野及草地,主產于云南、貴州和四川,云南分布較為廣泛,在大理、楚雄、昆明等均有分布[2]。娃兒藤屬植物在前期研究中具有抗腫瘤、抗炎活性[3-4]。在前期的活性研究中發現[5],云南娃兒藤乙醇提取物和不同萃取部位對炎癥晚期肉芽組織增生有顯著的抑制作用[5]。為進一步明確抗炎活性成分,促進資源的綜合利用,研究利用氣相色譜-質譜技術對其莖葉中的揮發性成分進行分析鑒定,以期為進一步全面認識云南娃兒藤的化學成分和生物活性研究提供理論依據。
1儀器與材料
11材料與試劑云南娃兒藤莖葉于采自云南楚雄,經云南中醫學院藥用植物教研室普春霞副教授鑒定為蘿摩科Asclepiadaceae娃禾偈Tylophora云南娃兒藤Tylophora yunnanensis Schltr,本論文研究材料為云南娃兒藤的莖葉;石油醚(分析純,天津市風帆化學試劑科技有限公司),甲醇(色譜級,德國默克公司)。
12儀器與設備Varian CP 3900-Varian saturn 2100T 氣相色譜-質譜聯用儀(美國安捷倫公司);HHS11-4電熱恒溫水浴鍋; RE-2000A旋轉蒸發儀(亞榮生化儀器廠)。
2方法
21樣品處理方法200g干燥的楚雄產地云南娃兒藤的莖葉,粉碎成粗粉,以石油醚回流提取3次,每次3h,合并3次提取液,減壓回收溶劑,得揮發性組分。取少量揮發性樣品,將樣品溶于色譜級甲醇中,備測。
22氣相色譜條件色譜柱:DB-5(30m×025mm毛細柱;進樣器溫度:280℃;升溫程序條件:初溫80℃,保持3min,程序升溫 20℃/min,終溫280℃保持10min;載氣:He(99998%),流速:10mL/min;進樣量1μL;分流比:30∶1。
23質譜條件EI離子源,離子源溫度:150℃,Manifold溫度:50℃,傳輸線溫度:280℃;掃描范圍m/z:40~650;背景質量:45u;標準質譜圖檢索庫NIST。
3結果與分析
對從石油醚提取得到的揮發性成分樣品進行GC-MS分析,其總離子圖見圖1。經過質譜數據系統(NIST)自動檢索上述樣品的質譜數據,將相似度低、離子峰低、無標準譜核對的組分等去除,得到揮發性成分。各組分的相對含量根據總離子圖由計算機采用峰面積百分比法計算而得。從云南娃兒藤莖葉的揮發性成分樣品中鑒定出18 個化合物,結果見表1。
以上分析結果表明,從云南娃兒藤莖葉石油醚提取的揮發性成分中分析鑒定了18個化合物,分別為甾醇類、黃酮類、生物堿類、酯類、羧酸類等,其結構類型多樣、復雜,具有多種生物活性。其中馬錢子堿具有免疫調節、抗腫瘤和抗心律失常、鎮痛等作用[6-9],角鯊烯具有調控膽固醇的代謝、抗氧化、抗腫瘤、保肝等作用[10-11],麥角甾醇具有抗菌、抗結核等作用[12-13],β-谷甾醇具有抗氧化、抗腫瘤等作用[14-15]。由于石油醚提取得到的揮發性成分,極性較小,難于分離得到單一化合物,通過GC-MS可以對其化學成分進行分析和鑒定,為其進一步的研究鑒定基礎。
4結論
實驗利用氣相色譜-質譜法研究了云南娃兒藤中的揮發性成分,鑒定其中18 種主要組分,并確定了它們的化學結構,這些結果為云南娃兒藤的活性成分的研究和資源的開發利用提供理論依據。參考文獻
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在考核方式上逐步實現從“分數評價”到“能力評價”的轉變
中藥化學課程的考核,一般是期終的卷面考試成績占據主導,再結合實驗報告的評分綜合判定。這種評價模式導致學生片面追求理論上的高分,而忽視了自身實際應用素質的提升。很多學生進入畢業設計階段后,對自己的課題束手無策,不知從何開始,就把所有的問題都推給指導老師,讓指導老師從實驗試劑的準備,到具體的實驗操作,到實驗結果的分析,到論文的撰寫全程負責,感覺是老師而不是學生自己在完成畢業課題。為此,在中藥化學課程的考核評價體系中,建議逐步降低卷面和實驗報告理論成績的比重,增加對實驗操作技能的考查,如對回流、蒸餾、萃取、鋪板等基本技能的熟練掌握程度。同時,也可以借鑒國外醫藥院校的考核標準,減少甚至取消考試試卷中選擇題、填空題、是非題等偏重記憶型題型,而以提取分離方案設計、成分的種類和結構鑒定等應用型題型為主。在實施科研導師制的醫藥院校,還可以借助相應的實驗技術平臺,結合學生跟隨導師開展的課題研究項目進行班級討論、實驗實踐、提交小組報告等,對學生的綜合應用能力進行評價。
在教學理念上逐步實現教師與學生向“應用型”的共同轉變
教師是學生最直接的榜樣,教師在教與學的過程中的行為處事、一言一行會對學生造成深遠的影響。因而要想培養出應用型的藥學人才,首先應該有應用型的教師。在中藥化學的課程教學中,這一點非常重要。作為中藥化學的教師,不僅應具有扎實的理論基礎,還應具有嫻熟的實驗操作技術。最關鍵的是,也應具備將理論轉變為實踐的應用能力。目前醫藥院校的教師,大多為博士和碩士畢業后直接進入高校任教,有較好的理論與實驗背景,但基本缺乏企業或公司工作經歷,在教學過程中也就無法進行相應技能的傳授。因此,中藥化學的任課老師除到國內外高校進行學術訪問或深造外,還應定期到制藥企業或藥物提取物公司等進行實習或培訓,增強教師自身的實踐經驗,從而為學生應用能力的培養提供必要的前提條件。
在實踐方式上逐步實現從“校內實驗室”到“校外實訓基地”的轉變
中藥化學的實踐一般在校內實驗室展開,場地較為局限,儀器設備等也由于教學經費等原因相對較為陳舊,數量較少,造成學生校內所學的和畢業后校外所用的在一定程度上的脫節,學生就業后難以實現“學”以致“用”的快速轉變。中藥化學的實踐,應在校內實驗的基礎上,將實驗基地擴展到企業或公司的提取濃縮車間或提取分離實驗室。由于在這些場所開展的工作,實質上是中藥化學實驗的規?;?,基本原理都和中藥化學課程中是一致的。通過在這些實訓基地的實際操作,不僅能讓學生熟悉并掌握規?;崛』蚍蛛x的流程以及儀器操作的方式,也能讓學生意識到中藥化學的實際應用價值和地位,有效地激發學生的學習中藥化學課程的興趣。“原來這就是超臨界流體萃取儀啊”“、原來標準品這樣制備就可以啊”……是學生在校外實訓基地發出的由衷感嘆。
在培養模式中注重“應用能力”與“協作、溝通能力”的同步提升
該項目首次對我國代表性桑樹品種的葉、枝和果的營養學和化學信息表征展開系統鑒評,構建起涵蓋營養成分、活性成分和特征化學成分的數據庫,為我國桑樹食藥專用品種的篩選提供了依據和基礎。在系統鑒評成分和藥理活性試驗的基礎上,率先篩選出一批活性成分含量高且藥效好的優勢桑品種,并建立起基于HPLC指紋圖譜技術的質量鑒偽體系,率先提出桑樹食藥用品種選育的新思路和新方法。相關研究內容填補了國內空白。率先開展桑樹GAP標準化種植技術研究并建立了符合GAP標準桑樹種植示范基地。項目組利用現代藥理學研究方法在細胞分子水平和動物整體水平上系統評價了桑樹資源主要活性成分的藥理作用和作用機理,為桑樹資源食用和藥用價值的開發提供了理論基礎。集成超聲、微波和膜濃縮等現代低溫提取濃縮工藝,建立了桑樹資源主要活性成分高效制備工藝及連續提取專利技術,大幅提升了活性成分從原料到成品的轉移率,并開發出一系列功能食品及基料,實現桑樹資源食用藥用價值的產業化開發。鑒定委員會認為,該項目創新明顯,總體達到國際先進水平,在桑樹資源活性成分數據庫構建方面部分內容達國際領先水平。項目的研究對于我國桑樹資源食藥用產業的發展具有重要意義。該項目共獲授權發明專利和實用新型專利4項,新申請發明專利5項,出版論著2部,發表學術論文37篇,制定地方標準2份,企業標準2份,技術規程9份。
項目相關技術在廣東、江西、浙江、四川等地多家企業進行推廣應用,據不完全統計,項目實施以來技術應用單位累計新增經濟效益總計4.9億元,同時帶動了中藥和食品等產業的發展。通過該項目實施提升了桑樹資源的多元化利用的新內涵,推動了桑樹GAP種植技術以及桑樹資源新產品和新工藝的產業化進程,產生了良好的社會效益和生態效益。該項目的實施也促進了桑樹資源內在食用和藥用價值的深度挖掘,豐富了傳統蠶桑產業“種桑―養蠶―繅絲―織綢”的單一模式,對于我國蠶桑產業的健康可持續發展具有重要的現實意義和戰略意義。
(獲獎等級:2012年廣東省科學技術獎一等獎;完成單位:廣東省農業科學院蠶業與農產品加工研究所、廣州采芝林藥業有限公司、廣東寶桑園健康食品研究發展中心;完成人:廖森泰、肖更生、鄒宇曉、施英、劉凡、周路山、吳娛明、徐玉娟、劉學銘、吳繼軍、唐翠明、陳衛東、陳智毅、張友勝、劉子放、羅國慶、羅文英、李升鋒、劉軍、蔡月仙、潘少茜、龍鏡池、姚錫鎮)